胚胎培养、组织培养和细胞培养

在多种动物整体实验的基础上，为了探讨明确的毒作用机制和寻找快速、简便、经济的检测生殖毒性的方法，中国在20世纪80年代开始开展胚胎培养、组织培养、细胞培养研究。第一，胚胎培养：中国在应用啮齿类动物全胚胎培养方法筛查致畸物方面已积累了丰富经验。对镉、过量维生素A、1，2-二氯乙烷、二硫化碳、铅等的测试结果表明，建立的方法对筛查致畸物和胚胎毒性是可行的。并提出经母体宫内染毒，取胚胎体外培养相结合的实验方法较好（第251 页图86）。第二，组织培养：兼顾化学物通过代谢后对生殖系统的作用和研究激素的作用、激素与毒物之间的作用、生殖细胞之间的功能协调等机制的研究。此外，还开展睾丸组织培养和胚胎器官如肢芽原基础培养。第三，细胞培养：包括卵巢细胞培养和雄性生殖细胞、支持细胞及间质细胞的单独培养和它们的混合培养；卵巢细胞培养操作相对复杂，做得较少，而睾丸的各类细胞培养已广泛应用，如大鼠睾丸支持细胞培养方法在检测硫丹、己烯雌酚和氯化镉雄性生殖毒性中的应用。这类研究排除了许多整体试验不能控制的干扰因素，对毒性作用机制的研究更有说服力。应用人胚上腭间质细胞，大鼠胚胎中脑神经元体外培养检测致畸物业已开展。

图86 胚胎发育过程（1.胚胎植入前发育过程；2.2004年中国全胚胎体外培养成功）