整理登记、编目和保存
(一)整理和登记
收集资源材料的整理登记是一项重要的基础性工作,由于收集工作量大、时间长,加上参加收集工作的人员结构比较复杂。收集信息难免有一定的误差和记录错误,在登记过程中需要通过对采集样及其信息进行及时的核对和整理来校正。整理工作对应登记表格进行,包括取样时间、地点(县、乡、村)、GPS信息数据、生产地地形、土壤、作物结构,以及样本特性(粒形、种皮颜色、种脐颜色、百粒重)、所属种及其名称、农家俗称及相关农艺特性、用途等进行一一核对修正。整理完成后,按收集时间先后编订保存单位编号(云南省农科院保存编号,豌豆收集资源的代号为英文大写字母L,编号按千位数编制:L0001),登记入册。
(二)资源编目
编目信息包括收集登记信息和完成初级评价的信息。编目分两个级别,即云南目录和国家目录。编目按国家统一制定的项目和数据标准进行,编目排列顺序首先按国家行政区划顺序,再按粒色由浅到深排序编制。编制项目包括:统一编号(G0000001)、保存单位、保存单位编号(L000)、品种资源名称、原产地或来源地、熟性(早、中、晚)、播种日期(月/日)、出苗日期(月/日)、成熟日期(月/日)、全生育日数(天)、花色、株高(cm)、有效茎枝数(枝/株)、单株荚数(荚/株)、单荚粒数(粒/荚)、单株产量(g)、荚长(cm)、荚宽(cm)、均匀度(均匀、中等、差)、粒色(种皮颜色)、粒型(圆、椭、方、皱)、百粒重(g)、蛋白含量(%)、淀粉含量(%)、主要抗性(高抗、抗、中抗、感、高感)。完成出版目录编制的豌豆资源共158份,其中包括育成的品种6份,入库量占云南豌豆收集资源近41%(后续编目工作采用电子数据库的形式正在持续进行),分别编入1、2、3集国家豆类资源目录和云南省豆类资源目录。
(三)资源繁殖保存
豌豆是自花授粉作物,但是遇高温或干燥等不良条件时,也可异交。豌豆资源保存依赖种子繁殖开花期对授粉的严格控制,以保证每一份资源材料群体遗传结构的完整性,达到最大限度地为资源研究和育种加改良利用提供良好基础材料的目的。(https://www.daowen.com)
1. 资源种子繁殖
豌豆资源种子繁殖技术基于两种基本形式:①纯合繁殖,对收集到的资源在完全隔离授粉的条件下进行超过5个世代的单株选择,形成遗传性状特异的单粒遗传近交系资源材料。②混合群体繁殖,在隔离授粉的条件下种植,收集采集样所有单株的个体混合保存。云南豌豆地方资源主要采用混合群体繁殖保存的形式,隔离方法采用网室隔离、地形隔离和繁殖地周围种植开花期一致的十字花科作物(油菜等冬季作物)隔离等技术。根据繁种材料份数的多少选择隔离方式。
2. 资源保存
云南豌豆资源保存分为两个级别:①国家种质库保存。完成国家目编制的种质资源进入该级别的保存,按国家库种质资源要求的种子质量标准(种子净度100%、粒色一致,发芽率高于95%),每份材料500g,供国家种质资源长期库、中期库入库保存。②云南省农业科学院保存。院级豌豆种质资源保存的方式有两种:一种是-18℃的低温保存,采用真空锡箔袋包装,一般保存时间10~15年,按国家库种质资源要求的种子质量标准,每份材料保存100粒;第二种是常温下仓储保存,采用密封瓶加干燥剂的包装方式,放置于冷凉通风的仓库种子架/柜中,一般可保存5~7年,每份种子保存500~750g。国家库保存的资源样均属于混合群体样。云南省农业科学院保存的种质同时包括了部分纯系种质,并保存了所有能完成足量繁殖收获的收集样,目前完成保存的收集样本为300多份,其余样品的保存将在近年内完成。
3. 保存资源的更新
资源的更新:每7~12年,分别对低温冷库和常温库豌豆保存资源进行一次更新繁殖,发芽率低于50%的保存样本,批次进入更新繁殖。更新完全采用隔离条件下收获材料混合群体的繁殖方式进行,以保持资源材料原样群体遗传结构。