血清特异IgE检测

第二节 血清特异IgE检测

过敏是一种常见的变态反应。通过定量检测血清中的血清特异IgE(sIgE),有助于明确Ⅰ型超敏反应性疾病过敏原的类型。与总IgE相比,在辅助诊断和治疗方面更加实用。

【检测原理】 本试验采用免疫印迹技术。病人血清中的sIgE可与吸附于硝酸纤维素膜表面的特异性变应原结合,经过生物素-链霉素放大系统的放大后,与底物结合,在试剂条上沉淀显色。颜色深浅与血清中sIgE抗体含量成正比。

【适应证】

1.可用于辅助诊断和治疗各种过敏性疾病。如花粉症、特异性湿疹、外源性哮喘、荨麻疹、过敏性鼻炎等。

2.可用于湿疹(遗传性过敏性湿疹、静脉性湿疹、手掌及脚掌真菌引起的湿疹、水疱性或神经性的湿疹)和其他皮肤的疾病(如持久不可愈的腿部溃疡和银屑病等)的鉴别诊断。

【标本采集】 血清。

【操作方法】

1.将试剂盒恢复至室温(20~22℃)。

2.用蒸馏水1∶25稀释洗脱液。

3.用清洗液湿润硝酸纤维膜,在检测板上加入250μl的血清标本,在混匀器上室温孵育45min。

4.彻底冲洗。

5.加入250μl抗体,在混匀器上室温孵育20min。

6.彻底冲洗。

7.加入250μl链霉亲和素标记物,在混匀器上室温孵育20min。

8.彻底冲洗。(https://www.daowen.com)

9.加入250μl底物,在混匀器上室温孵育20min。

10.流水冲洗终止底物酶反应。

11.完全干燥后用仪器读取数据。

【结果判读】 见表11-1。

表11-1 过敏原特异性IgE含量与分级关系

图示

【参考范围】 分级:0;过敏原特异性IgE含量:无。

【临床意义】 Ⅰ型超敏反应:由Ⅰ型超敏反应所致的过敏反应性疾病:如特异性湿疹、外源性哮喘、花粉症、荨麻疹、过敏性鼻炎等,病人的血液中存在过敏原特异性IgE。

【局限性】

1.本试验检测的是Ⅰ型超敏反应。当患者出现过敏反应的临床症状,但本试验阴性时,应考虑到Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应或混合型超敏反应可能性。

2.由于过敏原种类繁多,本试验可能出现总IgE阳性,而特异性IgE阴性的情况,可能是由其他过敏原引起的过敏反应。

【方法学优点】

1.可同时检测20余种sIgE,并可定量表示结果。

2.操作便捷,成本低。

3.与皮试样本比较,敏感度95.1%,特异性80.2%,准确性88.3%。