引物的重要性

引物的重要性

不论PCR实验的最终目的是什么,这个实验的具体目标都是扩增一个特定的DNA片段。 这个片段可以是一个完整基因,也可以是基因中的一段,甚至可以是一个根本不是基因的DNA片段,那就要看我们要利用PCR做什么事情了。 现在,由于人类基因组计划的成功,人类的整个细胞DNA(叫做“基因组”,因为这个DNA是由许多基因所组成的)的序列已经基本测定出来,所以我们可以很方便地找出一段我们需要的DNA来加以扩增。 这些DNA序列,只要访问几个国际生物技术信息网的数据库,就可以找到。 常用的生物技术数据网有美国国家生物信息中心网站(www.ncbi.nlm.nih.gov)、欧洲分子生物学实验室网站(www.embl.de)、日本的DNA数据库(www.ddbj.nig.ac.jp)等。 这些数据库都是对全世界科学家免费开放的。

从网上下载了我们需要的DNA序列后,就可以开始设计PCR实验。PCR实验设计首先要设计的就是引物。 不用说大家都明白,引物是PCR最基本的东西,没有引物当然PCR想都别想,引物做得不好,PCR也成功不了。 所以引物的设计是我们最需要动脑筋花工夫的。 但是,引物的设计又和PCR实验的条件——温度和保温时间——密不可分;因此在设计引物前,我们先要了解一下我们要做的PCR实验的具体条件。