一、临床诊断要点
1.流行病学特点
牛羊等多种家畜及人均可发病（禽类除外），多呈散发。
2.临床症状特点
病畜常表现最急性型，呈脑卒中经过，发病急、病程短，往往不见临床症状。外表完全健康的牛羊突然倒地，全身战栗，摇摆，昏迷，磨牙，可视黏膜发绀，呼吸极度困难，天然孔流出带泡沫的暗红色血液，常于数分钟内死亡。有的不见任何症状，突然倒地死亡。
3.病理剖检特征
尸体呈典型的败血变化，尸僵不全，尸体极易腐败；天然孔流出带泡沫的暗红色血液；血液凝固不良，黏稠如煤焦油样；全身多发性出血，皮下、肌间及浆膜下结缔组织出血性浸润；脾脏显著肿大（彩图9），脾髓呈暗红色、粥样软化等。
4.类症鉴别
在临床上很相似的病症有牛羊猝死症、羊肠毒血症、羊快疫、羊猝狙、羊黑疫等病，要注意加以鉴别，鉴别要点见本章第八节。
5.实验室诊断
在本病的诊断中，《中华人民共和国动物防疫法》明确规定，对疑似病例禁止解剖，故确诊一般要依据实验室细菌学或血清学检查。
（1）细菌学检查 常做以下2种试验。
1）直接镜检。采集病畜的末梢静脉血或切一点耳尖涂抹标片；用瑞氏染液或碱性亚甲蓝染液染色；在显微镜油镜下观察，发现大量单在、成对或2～4个菌体相连的短链排列呈竹节状、菌体周围有荚膜的粗大杆菌，即可确诊（彩图10）。
2）串珠试验。本试验具有简单、敏感、特异性高的特点，是炭疽病的快速诊断方法之一。具体方法有液体培养法、固体培养法和串珠荧光抗体法3种。常用固体培养法，其操作步骤为：在已经高压灭菌并保持至50℃左右的营养琼脂（9毫升）中，加入5国际单位/毫升的青霉素溶液1毫升，迅速混匀并倾注于平板（使琼脂厚度约达2毫米），凝固后以无菌操作切成1厘米×1厘米的琼脂块，置于灭菌清洁载玻片上。取一接种环幼龄培养物（被检菌接种肉汤培养6小时左右）置于该琼脂块中央，并覆以灭菌洁净盖玻片，放入有湿棉球的无菌平皿中，于37℃下培养2～3小时，直接涂片、染色、镜检观察，若菌体膨大呈圆形串珠状即可确诊。
（2）血清学检查 常用Ascoli反应，本试验是在病料腐败、细菌培养失效时，或对动物皮张和风干、腌浸过的肉品，仍可进行诊断的简便而快速的方法，其试验步骤如下。
1）病料制成沉淀原。其制作方法有3种：热浸出法、冷浸出法和氯仿处理法。
①热浸出法。取被检病料（脏器、血液等）1～5克，在乳钵内研碎，加5～10倍的生理盐水，装入试管内煮沸20～30分钟，经石棉或滤纸过滤或离心沉淀，获得透明的浅黄色液体，作为沉淀原。(https://www.daowen.com)
②冷浸出法。取干皮（鲜皮先置于37℃温箱中烤干），经高压121℃灭菌30分钟后，再烤干，用剪刀剪成微细的碎块，称重后加入5～10倍的0.3%苯酚生理盐水，置室温下浸泡18～24小时，用石棉或滤纸过滤，获得透明的液体，作为沉淀原。
③氯仿处理法。若被检材料含有脂肪，不宜获得透明滤液，则可将被检材料剪碎研磨，加入适量的氯仿处理5～6小时后将氯仿倒出，再加入生理盐水浸泡2～3小时，过滤浸出液，可获得透明的液体，作为沉淀原。
2）沉淀素血清。由生物制品厂提供。
3）操作程序与结果判定。
①重叠法。取沉淀反应管1支，用毛细管吸取炭疽沉淀素血清0.3～0.5毫升加入沉淀反应管内，用另一支毛细吸管吸取制备的沉淀原0.2～0.4毫升，沿试管壁小心地加在沉淀素血清之上。注意避免产生气泡，两液接触面整齐，经3分钟（皮张15分钟）判定结果。在阳性对照管两液接触面处出现一清晰白色沉淀环，而阴性对照管两液间无白色沉淀环的前提下，有清晰白色沉淀环者，判为阳性反应；无白色沉淀环者判为阴性反应。当两液接触面处出现模糊不清、疑是白色沉淀环时，应重复操作。
②逆叠法。用毛细吸管吸取0.2～0.4毫升沉淀原加入反应管内，用另一支毛细吸管吸取炭疽沉淀素血清0.3～0.5毫升，插入管底，徐徐放入血清，将沉淀原浮起重积在血清之上（因血清密度较大），约3分钟判定结果，判定方法同上。
在进行上述反应时，要注意设下列3组对照：
阳性对照：标准炭疽沉淀原+炭疽沉淀素血清。
阴性对照：标准炭疽沉淀原+健康牛羊血清；生理盐水+标准炭疽沉淀原。
（3）注意事项
1）病料的正确采集和处理。疑似炭疽病例死亡的病畜应禁止解剖，病料可采取尸体的末梢血液，或切下一小块耳尖，必要时，在腹部切一小口，取出小块脾脏。注意切割部位的消毒和包裹。切割、采集的病料应放于密封的容器内。
2）血清学检查一定要设阳性和阴性对照管，在对照管出现正确结果的前提下，才能判定实验结果。
注意
炭疽病是重要的人畜共患病，炭疽杆菌一旦离开畜体，即刻形成芽孢，抵抗力特强，故疑似病例严禁解剖，所有接触人员一定要注意个人防护，必要时应进行服药预防。
