骨组织形态学和标准骨形态计量学分析

(四)骨组织形态学和标准骨形态计量学分析

用于组织形态学分析的骨组织 (通常为股骨或者胫骨)用4% PFA固定、70%乙醇保存、塑化包埋硬组织切片或者EDTA脱钙后石蜡包埋切片。切片进行三色染色、TRAP染色 (破骨细胞)、H&E染色等组织学染色,根据标准体视学原理,借助计算机辅助的图像分析系统对成像进行量化分析。组织形态计量学变量 (面积、周长、厚度)借助显微镜进行测量,数学推导和单位由美国骨与矿物质研究协会标准化,通常表示如下:源测量/参照物。组织形态计量学参数大体分为两类:结构指标和骨重建指标,后者又被分为静态和动态两种参数[118]

结构指标是评估骨结构与预测骨强度的基础,包括:松质骨体积 (BV/TV,%,松质骨占据总骨髓腔体积比例)、骨小梁厚度(Tb.Th,μm)、骨小梁数量 (Tb.N,单位距离上的骨小梁数量)、骨小梁间距 (Tb.Sp,μm)、骨皮质宽度 (Ct.Wi,内、外皮层平均厚度)、墙宽 (W.Th,水泥线到骨髓腔厚度)、骨单位或数据包、骨髓腔直径 (size ofmarrow cavities,μm)[118]。(https://www.daowen.com)

重塑参数的静态参数包括:类骨质体积 (OV/BV,%)、类骨质表面积 (OS/BS,%)、类骨质厚度 (O.Th)、骨吸收面积 (ES/ BS,%)、成骨细胞表面积 (Ob.S/BS)、破骨细胞表面占用(Oc.S/BS)。若硬组织切片的骨组织在活体内被钙黄绿素、四黄素标记,即可检测动态参数,包括矿化表面 (MS/BS,%)、矿化沉积速率 (MAR,μm/d)、骨形成率  [BFR/BS,μm/(d× 100)]  等[118]