破骨细胞体外功能分析

将破骨细胞培养在牛骨片上，破骨细胞分解骨表面骨基质所形成的 “坑”被称为骨吸收漩涡 (resorption pit)，可以用麦胚凝集素(WGA)染色或者扫描电镜 (SEM)检测。WGA(wheat germ agglutinin)或者Lectin from Triticum vulgaris，对N-乙酰基-β-D-葡糖残基 (N-acetyl-β-D-glucosaminyl residues)和N-乙酰基-β-D-葡糖胺低聚物 (N-acetyl-β-D-glucosamine oligomers)具有亲和力，它可以特异性结合新鲜暴露骨片上的糖蛋白从而识别骨吸收漩涡。过氧化物辣根酶偶联的WGA催化底物显棕色，即可标记骨吸收漩涡。此外，通过检测Ⅰ型胶原 (type I collagen)肽段降解的C末端肽 (CTX-I，β-isomerised and cross-linked di-peptides Glu-Lys-Ala-His-Asp-β-Gly-Gly-Arg，β-异构化和交联的二肽谷氨酸-赖氨酸-丙氨酸的His-天冬氨酸-β-甘氨酸-甘氨酸-精氨酸)的浓度，也可表征骨吸收的强度。Ⅰ型胶原占骨有机基质的90%，在骨基质被降解的过程中，Ⅰ型胶原的降解肽段就会被释放到体液 (体内)或者培养液 (体外)中。(https://www.daowen.com)