快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
(1)发病特点 自然条件下仅猪感染,各种猪均易感,发病无季节性,冬春季多发。主要由消化道感染,皮肤伤口、口腔黏膜和呼吸道黏膜也可感染,免疫猪群也常发病。虽然在病猪的全身组织和体液内均有病毒存在,但以淋巴结、脾脏和血液中含毒量最高。病猪通过排泄物、分泌物散发病毒,即使病猪康复后仍可带毒、排毒。病猪肉品、脏器、污水也可散发病毒。
(2)临床症状
1)典型猪瘟:病猪体温升高、稽留热型,皮肤、黏膜发绀和出血,按压时不退色,呈急性败血症经过。病程稍长的猪表现弓背、寒战、厌食,初便秘后腹泻,粪便恶臭附有黏液或血液,多在一周左右死亡。不死的猪转为慢性,体温时高时低,食欲时好时坏,病程20天以上,多数转归死亡,病变明显。
2)非典型猪瘟:又称温和型猪瘟,发病时症状不典型,体温不高或低热,多以持续性腹泻为特征,精神委顿、背毛粗乱、迅速脱水、消瘦,病程长,死亡率低,病变不明显。
3)神经型猪瘟:多发于2~15日龄仔猪,出现神经症状,如肌肉震颤、磨牙、转圈、倒地痉挛等症状,角弓反张,最后抽搐死亡。
4)迟发型猪瘟:部分先天感染弱毒株后,毒株在体内增殖,毒力逐渐增强,表现为迟发型猪瘟,一般体温正常,几个月后出现精神沉郁、厌食,病情加重时腹泻,后肢麻痹死亡,存活者往往成为亚临床感染的带毒者,从而形成恶性循环。
5)繁殖障碍型猪瘟:母猪在配种期、妊娠期注苗,或母猪带毒导致繁殖障碍,妊娠母猪早产(5~7天)、晚产(2~8天)、流产、产死胎,产出的仔猪或同窝貌似正常的哺乳仔猪15~20日龄死亡。母猪自身不发病,食欲和精神状况正常。免疫母猪的免疫反应低下,当强毒攻击时,仍可引起亚临床感染,导致母猪繁殖障碍。
2.病理学诊断
耳、四肢、胸、腹等处皮肤上常见紫红色斑点,脏器表面有不同程度的出血点、出血斑,特别是肾、膀胱黏膜上的出血点,是猪瘟的特征性病变,喉头和会厌软骨有不同程度的出血。全身淋巴结尤其下颌、肠系膜淋巴结肿大,呈暗红色,周边出血,淋巴结外观呈红色、体积肿大,切面多汁。由于淋巴组织坏死和网状细胞增生而呈现灰黄色或灰白色,切面实质呈红白相间的大理石样外观。
脾稍肿大,边缘的被膜下,出现绿豆大小呈暗紫色的出血性梗死。梗死灶突于脾被膜表面,质地稍坚硬,切面呈暗红色,致密而干燥。肾稍肿大,被膜易剥离,呈土黄色,表面及切面皮质有点状出血,当出血点特别多时,肾表面则形成麻雀蛋样外观。胃肠道出血坏死,尤其盲肠、结肠及回盲瓣处黏膜上,发生大小不等的特征性纽扣状溃疡。
3.免疫学诊断
(1)猪瘟病毒快速检测 选用猪瘟病毒快速检测试纸条或检测卡,检测猪血清或组织匀浆悬液中的病毒,可在5~20min内获得检测结果。此法简便易行,结果直观。具体操作如下。
1)加样:在检测卡的加样孔内加入2滴(100μL)待检血清稀释样品或组织匀浆悬液。用试纸条检测时,将试纸样品端插入上述样品。
2)结果判定:5~20min内观察结果。在检测卡或试纸条上出现两条紫红色线判为阳性;仅出现一条紫红色线判为阴性。无紫红色线出现时,判为无效检测,说明检测卡或试纸条失效,详见彩图2-1和彩图2-2。
(2)兔体交叉免疫试验 猪瘟强毒不引起家兔体温反应,但能使家兔产生免疫力,当用猪瘟兔化弱毒攻击时不引起体温升高。如果所接种病料不是猪瘟病毒,则用猪瘟兔化弱毒攻击后,家兔体温升高。此法简便易行,特异性强,可鉴别被检病料中的强、弱毒株。
1)病料处理:取病猪脾或淋巴结,研磨或匀浆制成1∶10悬液,离心后取上清液,每毫升加青霉素、链霉素各2000单位备用。
2)病料接种:取健康家兔4~6只,每8h测温1次,连测3天,确认体温正常时,将其分为两组,第1组每只兔肌内注射病料5mL。第2组不注射病料。注射后每隔6h测温1次,连测3天。(https://www.daowen.com)
3)疫苗接种:接种病料7~12天后,给两组兔每只耳静脉注射1∶10稀释的猪瘟兔化弱毒疫苗1mL。接种后每6h测温1次,连测3天,根据兔的体温反应作出判定,结果见表2-1。
表2-1 兔体接种试验结果判断表

注:0表示未接种,-表示无反应,+表示定型热或轻型热反应。
表2-1内a、b、c、d表示试验可能出现的4种情况及诊断。例如:a显示病料接种后,无体温反应,表明病料中不含兔化弱毒,再接种兔化弱毒仍无体温反应,说明病料接种已使兔产生了免疫,故病料中含有猪瘟强毒,判为阳性。如出现b、c、d反应情况时,可依此理进行分析,即可作出诊断。
(3)免疫荧光抗体试验 本法主要用于检查白细胞涂片、组织压片和冰冻切片中的猪瘟病毒抗原,可用于生前诊断或宰后检验。具体操作见表2-2。
表2-2 利用免疫荧光抗体检测猪瘟病毒抗原

(续)

4.分子生物学诊断
利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测猪瘟病毒,具体操作见表2-3。
表2-3 反转录聚合酶链反应检测猪瘟病毒

(续)

5.类症鉴别
(1)与猪肺疫的鉴别 两者均表现出体温升高,精神沉郁,皮肤有出血斑点。不同点是:猪肺疫多呈散发,发病率和死亡率比猪瘟低,一般不引起大流行。猪肺疫表现为呼吸困难,咳嗽,咽喉部呈急性、热性硬肿,俗称肿脖瘟;肺呈出血性、纤维素性或坏死性肺炎,肉眼可见肝变,大肠无可见病理变化,抗生素治疗有一定效果。
(2)与仔猪副伤寒的鉴别 两者均表现出体温升高,精神沉郁,腹泻,皮肤有紫红斑点。不同点是:仔猪副伤寒多发生于阴雨连绵季节和6月龄以下小猪,一般呈散发,急性的先便秘,后下痢,有时粪便带血,胸、腹部皮下呈蓝紫色。慢性的呈顽固性下痢。脾肿大呈紫色,无出血性梗死灶。大肠黏膜增厚,表面粗糙,不形成纽扣状溃疡。小肠有一层糠麸样坏死伪膜,易于剥落。使用抗生素和磺胺类药物治疗有一定的效果。