快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
（1）发病特点 发病无季节性，但以冬春和产仔季节多发，尤其在分娩高峰的母猪舍首先发生，几乎每窝仔猪均发病，窝发病率高达100%，分娩高峰期后，发病率降低。4～15日龄仔猪发病率几乎100%，死亡率85%，随着日龄的增长，发病率和死亡率逐渐下降，成年猪多呈隐性感染。此病由消化道和呼吸道传播。
（2）临床症状 妊娠母猪表现为流产，产死胎、弱胎、木乃伊胎，分娩提前或延迟；仔猪体温升高、沉郁，口吐白沫、腹泻、肌肉震颤，后腿发紫、站立不稳、步态蹒跚，头颈歪向一侧作圆圈运动或后退，四肢麻痹，头向后仰，角弓反张，肌肉痉挛，四肢游泳状划动，死亡率为50%～80%。断奶猪体温升高，咳嗽、打喷嚏、呼吸困难、拉黄色稀水粪便，耳尖发紫、犬坐，有神经症状。成猪和哺乳母猪多为隐性感染，少数出现咳嗽，打喷嚏、呼吸困难，食欲减退，无继发感染者6～7天后恢复正常。
2.病理学诊断
鼻腔卡他性或化脓出血性炎症，扁桃体水肿并伴以咽炎和喉头水肿，勺状软骨和会厌皱襞呈浆液性浸润，并常有纤维素性坏死性伪膜覆盖。肺水肿，上呼吸道内有大量泡沫样液体，喉黏膜和浆膜可见点状或斑状出血。肠淋巴结和下颌淋巴结充血、肿大，间有出血。心包积液，心肌松软，心内膜有斑状出血。肾有白色粟粒大坏死灶，呈点状出血性炎症变化。胃底部可见大面积出血，小肠黏膜充血、水肿，黏膜形成皱褶并有稀薄黏液附着，大肠呈斑块出血。脑膜充血、水肿，脑实质有点状出血，脑脊髓液增多。肝硬化，表面有大量针尖大小的黄白色坏死灶。
3.免疫学诊断
（1）gE抗体ELISA检测 适用于gE基因缺失疫苗免疫猪群，判定猪群是否存在野毒感染。血清样品中含有常规用量的EDTA、枸橼酸钠或肝素等抗凝剂不影响试验结果。具体操作参见表2-5。临界值（CO.）=0.15。样本A值（S）/CO.≥1，判定为阳性；S/CO.＜1，判定为阴性。阴性对照血清A值应小于0.10，阳性对照血清A值应大于0.70，否则试验不成立，需重新测定。
对于gE基因缺失疫苗免疫猪群，若gE抗体阳性，表明猪群感染了PRV野毒株；若gE抗体阴性，表明猪群未感染野毒株。
（2）病毒中和试验
1）病料处理：无菌采取病猪脾和脑组织匀浆，加灭菌生理盐水制成1∶10混悬液，离心后取上清液，与伪狂犬标准阳性血清1∶1混合，室温作用30min。
2）动物接种：实验动物分为实验组和对照组，取上述混合物2mL接种实验组家兔的皮下，0.5mL接种小鼠脑内，对照组动物接种未经阳性血清中和的病料。
3）结果判定：如病料中含伪狂犬病毒，对照组家兔经2～5天，小鼠2～10天发病死亡。死前表现体温高，呼吸急促，抽搐，转圈运动。接种部位奇痒，并有啃咬痕迹，角弓反张，四肢麻痹。实验组动物不发病即可确诊。
（3）gE抗原乳胶凝集试验
1）定性试验：取被检血清、对照血清、稀释液各一滴，分别滴于载玻片上。各加gE乳胶抗原1滴，用牙签混匀，摇动1～2min，于3～5min观察结果。
2）定量试验：先将血清在微量反应板或小试管内作连续稀释，各取1滴依次滴于凝集反应板上，并设对照血清，随后各加乳胶抗原1滴，如上搅拌并摇动。
3）结果判定
“++++”：全部乳胶凝集，颗粒居于液滴边缘，液体完全透明。(https://www.daowen.com)
“+++”：大部分乳胶凝集，颗粒明显，液体稍混浊。
“++”：约50%乳胶凝集，但颗粒较细，液体较混浊。
“+”：有少许凝集，液体混浊。
“-”：液滴呈原有的均匀乳状。
对照血清成立时，以出现“++”以上者判为阳性。
对于gE基因缺失疫苗免疫猪群，阳性表明猪群已感染PRV野毒株，阴性表明未感染野毒株。
（4）gE抗原琼脂扩散试验 具体操作和结果判定按常规琼脂扩散试验方法进行。
对于gE基因缺失疫苗免疫猪群，阳性和弱阳性结果均表明猪群已感染PRV野毒株，阴性结果表明未感染野毒株。
4.分子生物学诊断
聚合酶链反应（PCR）检测伪狂犬病毒，选择伪狂犬病毒结构蛋白gp50基因上的保守序列设计PCR引物，提取病料中的总DNA作为模板进行扩增。具体操作详见表2-9。
表2-9 聚合酶链反应检测伪狂犬病毒
（续）
5.类症鉴别
（1）与猪传染性脑脊髓炎的鉴别 两者均表现体温升高，有神经症状。不同点是：猪传染性脑脊髓炎病猪不发生流产，脑、脾组织悬液人工接种家兔不发生奇痒症状。
（2）与猪瘟的鉴别 两者均表现体温升高，有神经症状。不同点是：猪瘟对各种日龄的猪其发病率和死亡率均高，仔猪发病时还出现神经症状，病程稍长的死亡病猪，其内脏可看到典型的猪瘟病变。伪狂犬病仅引起哺乳仔猪和断奶后的小猪大批死亡，架子猪、成猪常为隐性感染，如给家兔或猫接种病猪脑组织混悬液，则出现奇痒和啃咬注射部位的现象。
