快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
（1）发病特点 该病具有明显季节性，主要在7～9月份蚊子孳生季节发病，各种猪均易感，发病年龄与性成熟有关，大多在6月龄左右发病，其特点是感染率高，发病率低（20%～30%），死亡率低；新疫区发病率高，病情严重，以后逐年减轻，最后多呈无症状的带毒猪。病毒既可通过蚊子传播，也可经胎盘感染胎儿。
（2）临床症状
1）妊娠母猪常突发流产，产死胎或木乃伊胎，流产多发生在妊娠后期。流产时乳房胀大，流出乳汁，流产后胎衣滞留，自阴道流出红褐色或灰褐色黏液，同窝胎儿差别极大，小的如人的大拇指，大的像正常胎儿，流产后症状减轻，体温、食欲恢复正常。流产胎儿有的已呈木乃伊化，有的死亡不久全身水肿。
2）公猪表现为睾丸炎，高热后，常发生一侧睾丸肿胀（也有两侧同时发生），睾丸阴囊皱襞消失、发亮、发热，指压睾丸有痛感。经3～5天后睾丸肿胀消退，逐渐萎缩变硬，失去配种能力。如仅一侧发炎，仍有配种能力。
3）仔猪和育肥猪体温升高，呈稽留热，精神沉郁，食欲减退，饮欲增加，结膜潮红，粪便干燥，尿呈深黄色。仔猪出现神经症状时，则表现为转圈运动，视力障碍，摆头，乱冲乱撞，后期后肢麻痹，倒地不起而引起死亡。
2.病理学诊断
流产胎儿皮下水肿，脑积水，肌肉褪色，肝肿大、贫血、质硬、有坏死小点，脾边缘出血梗死，全身淋巴结肿大，边缘出血。发病仔猪脑膜充血，脑室和脊髓腔液增多，肝、肾肿大，有坏死灶；后躯皮下水肿，全身肌肉退色；胸腔、心包积液，实质脏器有散在小出血点，出生后不久而死亡的仔猪，常有脑水肿或头盖骨异常肥厚、脑萎缩。公猪睾丸有实质充血、出血和许多小颗粒状坏死灶；睾丸硬化者，体积缩小，与阴囊粘连，实质结缔组织化。
3.病原学诊断
（1）病毒分离鉴定 无菌采脑组织研磨，用灭菌生理盐水制成1∶10的悬液，以3000r/min离心30min。取上清液，接种于肉汤，作无菌检查。再接种4只体重6～8g的小鼠，每只脑内注射30μL，观察21天，如小鼠无死亡，可再观察7～10天剖杀1只进行盲传，如仍无死亡，证明未分离出病毒。小鼠接种后5～9天如发病死亡，采其脑组织再次感染小鼠，如连续两代均发病死亡，而又未发现致病菌时，即可作出诊断。
（2）血凝抑制试验 乙型脑炎病毒能够凝集鹅、鸽和雏鸡的红细胞。血凝抑制抗体一般病后4～5天产生，因此，测定血凝抑制抗体可以较早对乙型脑炎作出诊断。其操作方法是：将被检血清作10的倍比稀释，加入8个凝血单位的病毒液，作用一定时间后，加入配好的鹅或1日龄雏鸡的红细胞悬液。以能够抑制病毒凝集红细胞的血清最大稀释倍数定为该血清的血凝抑制效价，详见表2-14。
在对照组成立时，被检血清稀释终点为“-”时判为阳性，否则判为阴性。
非免猪群为阳性时，表明已感染乙脑病毒；为阴性时，表明未感染乙脑病毒。免疫猪群为阳性时，表明已产生免疫效力，如果抗体效价显著高于历史记录，则暗示强毒感染；阴性时表明免疫失败，需再次免疫。
4.免疫学诊断
（1）病毒中和试验 取病料处理上清液并作倍比稀释。试验分两组，一组加抗乙脑阳性血清，一组不加阳性血清，只加灭活正常豚鼠血清，各管置于37℃水浴2h。每组小鼠4～5只，每只脑内注射30μL，隔离观察14天，根据每组小鼠死亡数，判定结果，阳性血清组小鼠存活，对照组小鼠死亡，则可确诊。(https://www.daowen.com)
表2-14 乙型脑炎病毒红细胞凝集抑制试验
注：“-”表示凝集被抑制，“+”表示凝集不被抑制。
（2）病毒抗体ELISA检测 用乙脑病毒重组抗原包被板检测猪血清中的病毒抗体。具体操作参考表2-5。以空白孔调零，在450nm波长处测量各孔的吸光值（OD450值）。阳性对照孔OD450≥0.4，阴性对照孔OD450≤0.10试验成立；临界值为阴性对照孔平均值加0.15。样品OD450＜临界值判为阴性；样品OD450≥临界值判为阳性。
提示 非免猪群为阳性时，表明已感染乙脑病毒；为阴性时，表明未感染乙脑病毒。免疫猪群为阳性时，表明已产生免疫效力，如果抗体效价显著高于历史记录，则暗示强毒感染；为阴性时表明免疫失败，需再次免疫。
5.分子生物学诊断
利用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测猪乙脑病毒，具体操作见表2-15。
表2-15 反转录聚合酶链反应检测猪乙型脑炎病毒
（续）
6.类症鉴别
（1）与猪细小病毒病的鉴别 两者均表现流产，产死胎、木乃伊胎等症状。不同点是：猪细小病毒常年发病，多发生于初产母猪，母猪不表现临床症状，公猪不出现睾丸炎，仔猪不表现神经症状。而猪乙型脑炎发病有明显季节性，一般在7～9月发生，公猪发生睾丸炎，育肥猪持续高热和新生仔猪脑炎。
（2）与伪狂犬病的鉴别 两者均表现流产，产死胎、木乃伊胎，仔猪有神经症状。不同点是伪狂犬病一年四季发病，新生仔猪体温升高、呕吐、腹泻，死亡高率；育成猪、公猪一般呈隐性感染，有时表现轻微呼吸道症状。而猪乙型脑炎，发病有明显季节性，多在7～9月发病。公猪呈现睾丸炎，育肥猪持续高热，新生仔猪脑炎。
（3）与猪繁殖与呼吸综合征的鉴别 两者均表现流产，产死胎、木乃伊胎等症状。不同点是：猪繁殖与吸呼综合征哺乳仔猪突然发热、呼吸加快，断奶仔猪高死亡率，育肥猪出现典型肺炎，公猪不表现睾丸炎。而猪乙型脑炎发病有明显季节性，母猪产死胎，公猪表现睾丸炎，仔猪出现神经症状。
