快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
（1）发病特点 自然条件下马、牛、猪较易感，人与病猪接触也易感发病。发病有明显季节性，以蚊、螨活跃的夏、秋季多发，一般通过唾液、水疱液散播病毒，经损伤的皮肤和黏膜传播，也可经消化道感染，或经双翅目昆虫叮咬感染。
（2）临床症状 潜伏期3～4天，病初体温升高，精神沉郁，食欲减退和流涎。病猪鼻部水疱较为多见，蹄部水疱发生于蹄叉，少见于蹄冠，内含黄色透明的液体，水疱破溃后形成糜烂和溃疡。此时若继发细菌感染，可导致蹄壳脱落，病猪站立不稳、跛行。无继发感染时7～10天可以康复。
2.病理学诊断
病变部位有局部坏死，病变周围细胞变性、水肿，初期在表皮的马尔皮基氏层的上皮细胞间浆液蓄积，不久相互融合、扩大形成水疱。水疱上部的上皮细胞不久变性坏死，以致在真皮发生白细胞浸润，呈现不同程度的炎症。
3.病原学诊断
（1）病毒的分离培养 无菌采取水疱液，接种于猪肾细胞、仓鼠肾细胞或鸡胚成纤维细胞，于37℃培养48～72h，可产生细胞病变和蚀斑。(https://www.daowen.com)
（2）动物试验 无菌取水疱液或水疱皮匀浆上清液，肌内注射成年鼠10只，每只注射0.5mL，观察3～5天，当10只成年鼠均发生死亡时，可判定病料含有被检病毒。
4.免疫学诊断
（1）病毒中和试验
1）病料处理：将病料水疱液用无菌生理盐水制成1∶5稀释液，每毫升加双抗2000单位。将其分为A和B两份，分别加入等体积水疱性口炎阳性血清和生理盐水，分别置37℃温箱中作用1h。
2）试验操作：将上述两种处理液分别加入铺满单层BHK-21细胞的细胞培养板上，每孔加30μL，并设空白对照孔。每孔再加入150μL细胞维持液，于37℃培养48～72h。空白对照和加A处理液的孔均无细胞病变，加B处理液的孔出现细胞病变时判为阳性。否则判为阴性。
（2）酶联免疫吸附试验 利用表达的病毒核蛋白为包被抗原，建立检测抗体的酶联免疫吸附试验，灵敏度与中和试验相当，试验的临界值为0.278。样品OD450≥临界值，判为阳性；样品OD450＜临界值，判为阴性。试验操作参见表2-5。
5.类症鉴别
类症鉴别参考表2-7。
