快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
（1）发病特点 哺乳仔猪的易感性最高，一旦发病，同窝或同圈的猪都可感染死亡。断奶仔猪感染后多呈亚临床感染，病死率不高；妊娠母猪感染后，既可经胎盘垂直感染胎儿，又可经母乳传给胎儿，病毒主要存在心肌、肝、脾中。带毒鼠是主要传染源，可经消化道感染。
（2）临床症状
1）最急性型：常在无任何前期症状的情况下突然死亡，或经短时间兴奋虚脱死亡。
2）急性型：病猪可见短时间的发热、精神沉郁、减食或停食，有的猪表现震颤、步态蹒跚、呕吐、呼吸困难，或表现进行性麻痹。往往在吃食或兴奋时突然倒地死亡。断奶仔猪和成年猪多表现为亚临床感染。1～2月龄仔猪病死率最高，可达80%～100%。母猪在妊娠后期可发生流产、死产、产弱仔和木乃伊胎。
2.病理学诊断
胸、腹腔和心包积液，并含有少量纤维蛋白。心脏软而苍白，明显的心肌炎和心肌变性，心肌有不连续的白色或灰黄白色区，右心室扩张，心肌弥漫性灰白色，心室肌可见许多散在的白色病灶，有的呈纹状、圆形。肺常见充血和水肿。
3.免疫学诊断
（1）血清中和试验 在铺满BHK-21单层细胞的培养板中，首先弃去细胞培养液。将不同稀释度的阳性血清与等量的病毒培养物混合，于37℃作用30min，然后加到上述细胞培养板中，每个稀释度加3孔，继续培养观察。如果病毒能被标准阳性血清中和，则细胞不产生病变，判为阳性即可确诊。
（2）酶联免疫吸附试验检测抗体 以猪脑心肌炎病毒（EMCV）VP1重组蛋白为包被抗原，建立酶联免疫吸附试验。检测样品为病猪血清（不含NaN3）。具体操作参见表2-5。
阴性与阳性临界值的确定，选取30份标准EMCV抗体阴性血清，按照优化的反应条件进行间接ELISA，计算出30份血清OD450的平均值（X）和标准方差（SD）。当被检样品的OD450≥（X+3SD）时，判定为阳性；当样品OD450＜（X+3SD）时，判定为阴性。
提示：由于目前尚无疫苗用于免疫预防，因此，当样品为阳性时，表明猪群已感染猪脑心肌炎病毒；当样品为阴性时，表明猪群未感染病毒。(https://www.daowen.com)
4.病原学诊断
（1）动物试验 无菌取病猪的心肌或脾，用PBS液1∶10稀释后匀浆，离心后取上清液，腹腔接种小鼠5只，观察3～5天，如出现小鼠后腿麻痹而死，剖检又见心肌炎和脑炎病变，即可确诊。
（2）病毒分离培养 无菌取病死猪的心肌或脾匀浆，离心后取上清液，接种于鼠胚成纤维细胞和仓鼠肾细胞（BHK-21）进行病毒分离培养，病毒繁殖后可使细胞发生明显病变即细胞溶解。
5.分子生物学诊断
RT-PCR检测猪脑心肌炎病毒，具体操作及结果判定详见表2-17。
表2-17 反转录聚合酶链反应检测猪脑心肌炎病毒
（续）
6.类症鉴别
（1）与猪水肿病的鉴别 两者均表现发病突然，步态不稳等症状，不同点是：猪水肿病的病原为大肠杆菌，多在断奶前后、膘情好的仔猪中发病，以脸部和眼部水肿、胃底部肌层和黏膜层有大量透明的胶冻样液体为特征。
（2）与猪血凝性脑脊髓炎 两者均表现步态不稳，后肢麻痹，呼吸困难等症状，不同点是：猪血凝性脑脊髓炎多见于2周龄以内的哺乳仔猪，初厌食，后昏睡、呕吐、便秘，常堆聚、打喷嚏、咳嗽、磨牙。对响声和触摸过敏、尖叫。病毒接种于猪胎肾原代单层细胞，可见融合细胞形成。
