快速诊断及类症鉴别
1.临床诊断
(1)发病特点 7日龄以内仔猪,尤其是1~3日龄仔猪发病率高。7日龄以上很少发病,头胎母猪所产仔猪发病最严重,随着胎次的增加,仔猪发病逐渐减轻。窝内仔猪发病率高达90%以上,一般不低于50%,致死率很高,有时整窝发病,整窝死亡。仔猪通过哺乳或舔食母猪的皮肤而感染。育肥猪、成年猪不发病,发病没有季节性,多发于产仔时期。
(2)临床症状 仔猪出生后体质健壮,无明显症状,12h后突然有1~2头表现吃奶无力,呈昏迷状态,且很快死亡。随后同窝仔猪相继腹泻,排出黄色、黄白色、灰黄色带气泡的水样稀便,具腥臭味,肛门发红松弛,粪便沾污尾根、会阴、后肢。捕捉时鸣叫挣扎,排粪失禁。停止吃奶,极度消瘦,喜欢喝水,眼球下陷,皮肤失去弹性,最终因心力衰竭、虚脱、昏迷而死亡。
2.病理学诊断
肌肉苍白,颈部、腹下水肿,胃内充满凝乳块,胃黏膜和浆膜充血、出血、水肿,肠腔充满黄色、黄白色带腥臭的内容物,肠黏膜肿胀、充血或出血,肠系膜淋巴结充血、肿大、切面多汁。心脏、肾表面有坏死灶。
3.病原学诊断
(1)病原菌的分离与鉴定 从病猪的小肠前部采取内容物,在麦康凯琼脂培养基上划线培养18~24h,挑取红色菌落,接种于血液琼脂培养基上,培养18~24h,致病性大肠杆菌则部分出现溶血现象,挑取上述菌落,分别同O、K多价血清做平板凝集试验,对于凝集菌落可与K和O分型血清作玻片凝集进行血清型分类,或用单克隆抗体进行血清学鉴定,如为致病性血清型即可确诊。
(2)吸附因子的显微镜检 将回肠前段反复用无菌生理盐水冲洗,用接种环从黏膜取材做细菌涂片,染色镜检,阳性者在片中每个视野均可发现大量大肠杆菌。如果没有吸附因子则大肠杆菌被冲洗干净,视野中基本没有细菌,因此查出大肠杆菌的吸附因子,一般就证明是致病菌。(https://www.daowen.com)
(3)肠毒素检查
1)肠毒素制备:将家兔麻醉后,切开腹壁露出回肠,用肠线结扎,每段8~10cm,每只家兔可结扎5~6段。注射分离菌的液体培养物2~3段,每段注入2.0~2.5mL,同时另选两段作阳性和阴性对照。观察6~24h,如接种肠段与阳性对照都发生膨胀肿大,而阴性对照无此症状时,表明该菌为产肠毒素性大肠杆菌。
2)肠毒素鉴定:耐热肠毒素(ST),可采用酶联免疫吸附试验检测,待测标本OD大于阴性对照3倍以上者为阳性。不耐热肠毒素(LT),可采用双向琼脂扩散试验,将被检菌株按五点环形接种于Elek氏培养基上。以同样操作共做两份,于36℃培养48h。在每株菌的菌苔上放多粘菌素B纸片,于36℃经5~6h,使肠毒素渗入琼脂中,在五点环形菌苔各5mm处的中央,打ϕ4mm的圆孔,加热封底,并滴加LT抗毒素30μL,用已知产LT和不产毒菌株作对照,于36℃经15~20h观察结果。在菌斑和抗毒素孔之间出现白色沉淀带者为阳性,无沉淀带者为阴性。
4.类症鉴别
(1)与仔猪白痢的鉴别 两者均表现有腹泻的症状,不同点是:仔猪白痢以10~30日龄的仔猪多发。排出乳白色、灰白或黄白色,具有腥臭味浆糊状的粪便,很少引起死亡。而仔猪黄痢以7日龄以内,尤其1~3日龄仔猪多发,排出黄色、黄白色、灰黄色带气泡的水样稀便,发病率和死亡率均高。
(2)与猪梭菌性肠炎(仔猪红痢)的鉴别 两者均表现有拉稀的症状。不同点是:仔猪红痢的粪便带有血液,呈红褐色,并含有坏死组织碎片。腹腔内液体增多,呈红色;腹膜纤维素性炎症并和小肠粘连,空肠全部呈红色,发硬,有特殊纹理,肠内充气,肠系膜内有小气泡。取肠内容物加等量灭菌生理盐水,混匀后离心,取上清液0.2~0.5mL,静脉注射于体重20g的小鼠,可使小鼠迅速死亡,致病菌为C型或A型魏氏梭菌。
(3)与仔猪副伤寒的鉴别 两者均表现有腹泻的症状。不同点是:仔猪副伤寒多发于2~4月龄的仔猪,粪便中混有血液、伪膜,肠道有糠麸样病变,注射过仔猪副伤寒菌苗的猪很少发病。
(4)与猪传染性胃肠炎的鉴别 两者均表现有水样腹泻。不同点是:猪传染性胃肠炎发生于各种大小的猪只,一旦发病,迅速波及全群,10日龄以内的仔猪发病率和致死率最高,其他日龄的猪大多数能自然康复。其特征为呕吐,频繁水样腹泻,明显脱水。小肠壁菲薄,肠管扩大,黏膜变性,绒毛萎缩。