一 快速诊断
1.临床诊断
(1)中毒诱因 赤霉菌毒素是赤霉菌感染小麦和玉米后,在其生长繁殖过程中产生的代谢产物,其中主有两种毒素,即单端孢霉烯及其衍生物和玉米赤霉烯酮,前者可导致猪厌食、呕吐、流产及内脏器官的损伤,后者可导致猪生殖器官机能和形态学上的改变。
(2)临床症状 玉米赤霉烯酮中毒时,猪群的发病率可达100%,但死亡率很低。母猪阴户肿胀、坚实、光滑或明显突出。乳腺增生变大,子宫增生,阴道黏膜充血、发红、肿胀,严重时发生阴道垂脱,极易引起损伤和感染,部分病猪继发直肠脱出。小母猪出现发情症状,或发情周期延长。公猪及去势猪包皮水肿,乳腺肥大。母猪不孕或妊娠母猪流产、胎儿干尸化或胎儿被吸收等。单端孢霉烯中毒时病猪不食、呕吐、腹泻、生长停滞,当胃肠、心、肺、膀胱、肾出现出血性损伤时,易导致中毒猪的死亡。常伴有凝血酶原不足和凝血时间延长等特点。
2.病理学诊断
玉米赤霉烯酮中毒时的病理变化主要是阴道和子宫间质水肿,阴道和子宫黏膜上皮细胞分化为鳞状细胞的组织增生及变形,阴户、阴道、子宫颈壁及子宫肌层水肿增大,细胞器增生、细胞变大。子宫内膜增厚,黏膜下层间质性水肿。小母猪的卵巢明显发育不全,虽有许多卵泡而没有黄体。乳头和乳腺明显增大,乳腺实质的间质层水肿。单端孢霉烯中毒时的病理变化主要表现在肝、肾及肠道的出血和坏死性损伤。(https://www.daowen.com)
3.毒物分析
采集饲料3~5g,在75%酒精中浸泡2min,取出后放入灭菌三角瓶中,注入3倍量的无菌蒸馏水,在振荡器上振荡洗涤5min,再在蒸馏水中洗涤3~4次。
(1)分离培养 将处理好的饲料,接种于蔡氏琼脂培养基上。每个培养皿接种饲料颗粒10粒,轻轻加压种入浅层,于28℃培养36h后观察有无细菌生长。有细菌生长时,则形成菌落,培养48h后,菌落生长茂盛,有白色绒毛状菌丝体,基质呈红色。
(2)纯培养 将可疑菌丝体接种于蔡氏琼脂斜面上,于28℃培养66h。菌落呈粉红色,镜检菌丝体呈白色,有子囊,孢子呈纺锤形、圆形或椭圆形。
(3)鉴别培养 将纯培养的孢子,接种于5%葡萄糖马铃薯琼脂培养基上培养72h,菌丝白色呈缄毛状,基质呈粉红色。荧光灯照射培养物呈橙黄色,菌丝体呈紫色,即为小麦赤霉菌群体中的粉红色镰刀菌。