二、材料与方法

本文试验系用大叶黄杨（Euonymus japonica Thunb L f）带叶柄茎段进行离体培养。离体培养根据Addicott等（1948）的方法，并略加改进。每次试验选节位、年龄、大小一致的黄杨枝条，剪取其茎段，每段包括一对对生叶片，切去叶片，保留叶柄，如图1所示。

图1　黄杨离体叶柄培养材料

用直径为6厘米的培养皿，内铺2%约0.3厘米厚的一层琼胶，取10个上述切好的离体材料分二行插于琼胶内，在25℃恒温箱中培养，隔一定时间检查叶柄脱落的数目，叶柄经用小镊子轻压而掉下者作为脱落的标准（见图2）。这样培养的离体材料虽然不用无菌操作，在短期内也能保证无细菌感染。(https://www.daowen.com)

图2　（a）离体材料培养俯视图，培养初，未脱落（b）离体材料培养俯视图，培养24小时脱落

试验中用作处理的各种有机物质及呼吸途径抑制剂是以溶液滴在叶腋中，对照则滴蒸馏水（见图1）。需要注意的是，离体培养的所有试验虽然都是在相同的条件下进行的，但由于材料年龄的不同，因此脱落的绝对数值也是有变化的。