胡萝卜块根的实验
让我们先来观察一下植物的种子。它可以分为胚和胚乳两个部分。在植物的受精过程中可以看到,由花粉管送进胚囊中的两个精核,其中之一跟卵细胞结合,以后发育成胚(即幼小的植物);另一个跟胚囊中的次生细胞(位于胚囊中央,与营养有关)相结合,以后发育成胚乳(见图1)。胚乳的生长一般在胚之前,它供给胚以生长所需的养分和促进生长的物质。这说明受精卵的增殖能力受胚乳的直接影响。
在一棵长大的植物体内,如前所述,细胞因所在部分不同而会表现出不同的分生能力。看来,一个细胞能不能继续进行分裂,是受邻近细胞中的化学物质影响的。也就是说,细胞的分生能力主要受外在条件所控制。现在研究者已经成功地用实验证明,在适宜的营养条件下,一个成熟的植物细胞(如取自胡萝卜块根上的)可以像受精卵一样增殖发育,长成一株新的、同母体完全一样的植物(见图2和图3)。
此文发表于1964年“科学画报”7期89-90页。
图1 植物的受精过程示意图:由花粉管送进胚囊的两个精核,各自跟胚囊中的卵和次生细胞结合,前者发育成胚,后者成胚乳
图2 培养瓶转动时,细胞便从胡萝卜组织块上脱落
图3 天然长成的(从种子上剥离下来)胡萝卜胚(图左)同实验培育成的(图右)有明显相似之处
实验者把胡萝卜块根的组织切块,放在一个装有培养液的特制玻璃瓶中(见图4(a)~(c)),以研究在加或不加各种天然物质(如胚乳),以及人工合成的物质(如激素)的条件下,它是否能够恢复分生的能力。从试用过的一些物质中,发现椰子汁(液体胚乳)对促进细胞分裂最有效。放在含有椰子汁培养剂中的胡萝卜块根组织小块,由于生长而在20天内增重80倍。(https://www.daowen.com)
在不同时期内,研究者用铬酸和盐酸混合液使组织中的细胞离解,并用数血球的方法计算细胞的数目和体积。结果证明,在培养的初期细胞只增大体积而不分裂;当开始分裂后,细胞的平均体积又变小了(见图5);最后分裂速度变慢,细胞体积重趋增大。这种使块根中不再分裂的细胞又恢复增殖能力,是一件重大的科学成就,由此也不难推想,椰子汁中一定含有某种可以促使细胞恢复生长本能的物质。这种物质是什么呢?
图4 试管中生长的植物
(a)在无菌操作的条件下,用细钻孔器从胡萝卜块根的横切片(离形成层1~2毫米的不生长区)上取出重约2~3毫克的圆柱形组织小块;(b)将一些组织小块转移到一种特制的圆柱形玻璃培养管中,内盛少量椰子汁培养液,管侧有一个颈口,以通空气;(c)把培养管固定在水平装置的旋转轴上作垂直于地面的转动(每分钟一转),使附着在管壁上的胡萝卜组织可以轮替浸在培养液中和露在空气中,有利于生长;(d)将人工培养下长大的胡萝卜组织块移到一种特制的培养瓶中;(e)当把好几个培养瓶一起放在一个旋转着的平面上时,在离心力的作用下,胡萝卜细胞会从组织小块的边缘脱离下来;(f)将一些离体细胞移植到含新鲜椰子汁琼胶培养基中,它们会迅速以不同方式生长;(g)有些离体的细胞群会长成一株胡萝卜幼苗;(h)在试管内长成的完整的胡萝卜植株
图5 实验室中胡萝卜细胞的发育成长
(a)一个离体细胞;(b)离体细胞分裂长大;(c)细胞群开始具有一般胡萝卜植株组织的极性
研究结果还指明,对于有些植物的组织细胞,像马铃薯块茎,椰子汁并不能促使它恢复分生能力,而需要再加用其他物质做增效剂。如以百万分之六的2,4-二氯苯氧基乙酸加入含有椰子汁的培养剂中,马铃薯块茎的细胞就开始增殖了。更复杂的是对一些落叶树木(如糖槭)的休眠芽,椰子汁也不能促进它们生长,但经过冬季低温解除休眠以后,椰子汁就能发挥促进作用了。据证明在休眠芽中含有抑制生长的物质,抵消了椰子汁的作用,而在低温解除休眠期间,这类物质转化消失了。这些事实说明,细胞的生长除了适宜的养料、水分与温度等条件之外,还受到刺激物质和抑制物质的含量以及它们间相互作用的控制。