二、免疫及检测

（一）支原体免疫

支原体实验室检测方法有形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。解脲支原体MB抗原的研究表明：MB抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原，具有种特异性，包含血清特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基，N端1/3为保守区，包含群特异的抗原决定簇；C端2/3是由重复序列组成的可变区，包含型特异的抗原决定簇，对该抗原的研究及对于研究疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面，N端固定于膜上，使C端重复区暴露于微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础，C端最可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应，是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系，以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。

测定支原体抗体的血清学试验方法中，有支原体特异性血清学检测和非特异性血清学检测两大类。支原体特异性血清学检测方法中，最常用的是补体结合试验，另有间接免疫荧光染色检查法、生长抑制试验、代谢抑制试验、间接血凝试验、酶免疫法和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。支原体的非特异血清学检测方法有肺炎支原体冷凝集试验与MG链球菌凝集试验，对支原体肺炎能起辅助诊断的作用。检测特异性抗体IgG的方法尚不能达到早期快速诊断的目的，抗原的检测为今后研究的发展方向。目前已有用酶联免疫吸附试验、荧光标记抗体、肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中支原体抗原的报道，具有很高的特异度和灵敏度。人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早，一般在感染后1周出现，3～4周达高峰，以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2～3周，当患者出现症状而就诊时，IgM抗体已达到相当高的水平，因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如IgM抗体阴性，则不能否定肺炎支原体感染，需检测IgG抗体。IgG较IgM出现晚，需动态观察，如显著升高，则提示近期感染，显著降低则说明处于感染后期。

（二）衣原体免疫

衣原体感染后能诱导产生特异性细胞免疫和体液免疫。但保护性不强，为时短暂，因此衣原体的感染常表现为持续感染、反复感染或隐性感染。有些衣原体抗原注入人皮后内可造成免疫病理损伤。对于血清学检查，可用补体结合试验，抗体效价≥1∶64即有诊断价值；急性期和恢复期双份血清，抗体效价有4倍以上增高者则诊断意义更大。但补体结合试验的特异性和敏感性均较差。应用酶联免疫吸附试验（ELISA）或放射免疫分析（RIA）检测抗体，敏感性较高，但不同衣原体之间可有交叉反应。用免疫荧光法检测抗体，不仅敏感性很高，而且可检出不同的衣原体及其血清型。

（三）立克次体免疫(https://www.daowen.com)

以下血清学试验可用于立克次体感染的检测。

1.外斐反应　斑疹伤寒等立克次体的脂多糖与变形杆菌某些菌株的O抗原有共同的抗原成分。由于变形杆菌易于制备，其凝集反应结果又便于观察，因此临床检验中常用这类变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，这种交叉凝集反应称为外斐反应，用于检测人类或动物血清中有无相应抗体，供立克次病的辅助诊断。流行性斑疹伤寒患者对变形杆菌OX19菌株可产生较高效价的凝集反应，在发病2周末可达最高峰（1∶320～1∶5120）。地方性斑疹伤寒也可出现类似的凝集反应。但凝集效价较低，多在1∶160～1∶640之间。

2.补体结合试验　以颗粒性立克次体抗原做补体结合试验，不仅具有群特异性，还有种特异性，可用以区别流行性斑疹伤寒和地方性斑疹伤寒。

3.立克次体凝集试验　阳性反应的出现较外斐反应为早，且有较高的群特异性，用以区别其他立克次体病如恙虫病、Q热肺炎等。地方性斑疹伤寒的阳性反应相对较弱。

（龚文容　张　敏）