淋巴细胞表面标志的检测
(一)T细胞表面标志的检测
T细胞按照功能和表面标志可以分成很多种类。
1.细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell)主要表面标志是CD8
2.辅助性T细胞(helper T cell)主要表面标志是CD4。辅助性T细胞调控或“辅助”其他淋巴细胞发挥功能。CD4细胞是已知的HIV的目标细胞,在艾滋病发病时会急剧减少。
3.调节性/抑制性T细胞(regulatory/suppressor T cell)CD25+、CD4+的T细胞。负责调节机体免疫反应。通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用。调节性/抑制性T细胞有很多种。
4.记忆T细胞(memory T cell)在再次免疫应答中起重要作用。但暂时没有发现记忆T细胞表面存在非常特异的表面标志物。(https://www.daowen.com)
T细胞表面标志的检测方法有两类。一类是用标记抗体染色;另一类是用抗体致敏的红细胞做花环试验。后者的检测原理:T细胞表面的E受体可与绵羊红细胞结合形成玫瑰花样的花环,称为活性E(Ea)花环。检测Ea花环形成细胞可反映受检者的细胞免疫水平。
(二)B细胞表面标志的检测
1.B细胞表面抗原的检测 B细胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原,其中有些为全部B细胞所共有,而有些仅活化B细胞所特有,据此可用相应的CD系列单克隆抗体,通过间接荧光免疫法、酶免疫组化或ABC法加以检测。健康成年人外周血CD20阳性细胞占淋巴细胞总数的8%~12%。
2.B细胞受体的检测 B细胞表面有膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体,其中以SmIg为B细胞所特有,是鉴定B细胞可靠的指标。
(三)自然杀伤细胞(NK细胞)及功能的检测
NK细胞表面至少存在CD2、CD11b、CD11c、CD16、CD56和CD69等多种抗原,但均非NK细胞所特有,NK细胞具有细胞介导的细胞毒性作用,它能直接杀伤靶细胞。一般用K562细胞株作为靶细胞测定人NK细胞活性,用YAC细胞株测定小鼠NK细胞活性,检测方法包括形态法、酶释放法、荧光法、核素法和化学发光法。