计数方法适用性预试验(3)

七、计数方法适用性预试验(3)

7.1 试验组。分别取粉刺平凝胶1∶10的供试液2 mL,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,进行过滤,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗,每次100 mL,每膜200 mL,分别加入金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌及黑曲霉0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,培养、计数。

7.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液,进行薄膜过滤,测定阳性对照菌数。

7.3 供试品对照组。取粉刺平凝胶1∶10的供试液2 mL,加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中,用200 mL的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗,每次100 mL,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,进行培养、计数。

7.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基2 mL替代样品,薄膜过滤后取出滤膜,面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基上,进行培养、计数。

计数方法适用性预试验(3)结果见表7。

表7 计数方法适用性预试验(3)

注:1.-表示平板无菌落生长。
2.白色念珠菌1在胰酪大豆胨琼脂培养基计数,白色念珠菌2在沙氏葡萄糖琼脂培养基计数。
3.黑曲霉1在胰酪大豆胨琼脂培养基计数,黑曲霉2在沙氏葡萄糖琼脂培养基计数。

结果:计数中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌及黑曲霉回收率高于50%,方法可行。