计数方法适用性预试验

3.1 试验组。取复方胰酶散10 g加到灭菌的三角瓶中，加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，混匀，制成1∶10供试液，将供试液分别加到5个灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉的0.1 mL菌悬液，制成每毫升复方胰酶散1∶10供试液，含菌数小于100 cfu，取含菌的样品溶液0.2 mL，置直径90 mm的无菌平皿（已注入20 mL的胰酪大豆胨琼脂培养基）上，涂布5个平皿，测定菌落数。另取含白色念珠菌、黑曲霉菌的样品溶液0.2 mL，置直径90 mm的无菌平皿（已注入20 mL的沙氏葡萄糖琼脂培养基）上，涂布2个平皿，测定菌落数。

3.2 菌液对照组。加入到样品中的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液进行稀释，取稀释后菌悬液0.2 mL涂布，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌菌悬液加胰酪大豆胨琼脂培养基，白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养，测定阳性对照菌的菌数。

3.3 供试品对照组。取复方胰酶散1∶10供试液0.2 mL，置直径90 mm的无菌平皿（已注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基）上，按《中国药典》2015年版四部144页平皿法进行检查。

3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基0.2 mL替代样品溶液注皿，测定阴性对照菌数。

计数方法适用性预试验结果见表1。

表1 计数方法适用性预试验

注：-表示平板无菌落生长。

结果：计数中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉回收率位于50%～200%，方法可行。