方法适用性建立

五、方法适用性建立

5.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。

5.2 需氧菌计数方法适用性试验。

5.2.1 试验组。取强力枇杷露10 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100 mL,混匀,制成1∶10供试液,将供试液分别加到5个灭菌的三角瓶中,分别加入金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),制成每毫升强力枇杷露1∶10供试液,含菌数小于100 cfu,取含菌的样品溶液1 mL(小于100 cfu),置直径90 mm的无菌平皿中,每个菌液注2个平皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定菌数。

5.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液进行试验,测定阳性对照菌数。

5.2.3 供试品对照组。取强力枇杷露1∶10供试液1 mL置直径90 mm的无菌平皿中,注2个平皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定菌数。

5.2.4 阴性对照组。用同批灭菌的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液1 mL替代样品溶液,注2个平皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定菌数。

5.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。

5.3.1 试验组。取强力枇杷露1∶10供试液分别加到2个灭菌的三角瓶中,每瓶10 mL,分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),制成每毫升强力枇杷露1∶10供试液,含菌数小于100 cfu,取含菌的样品溶液1 mL(小于100 cfu),置直径90 mm的无菌平皿中,每个菌液注2个平皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定菌数。

5.3.2 菌液对照组。稀释后白色念珠菌、黑曲霉的菌悬液加沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定阳性对照菌数。

5.3.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体注皿,计数。

5.3.4 阴性对照组。用同批灭菌的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液1 mL替代样品注皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,培养、计数,测定阴性对照菌数。

计数方法适用性试验结果见表3。

表3 计数方法适用性试验

注:-表示平板无菌落生长。

5.4 大肠埃希菌方法适用性,采用常规方法进行试验,可以检出试验菌,方法可行。