金黄色葡萄球菌方法适用性预试验
4.1 常规方法。
4.1.1 试验组。取氢万溶液1∶10的供试液10 mL加到灭菌的三角瓶中，加入金黄色葡萄球菌菌悬液1 mL（小于100 cfu），加入100 mL胰酪大豆胨液体培养基，按《中国药典》2015年版四部147页金黄色葡萄球菌检查项进行试验。
4.1.2 阳性对照组。将金黄色葡萄球菌菌悬液1 mL（小于100 cfu）加到100 mL胰酪大豆胨液体培养基中，按《中国药典》2015年版四部要求进行检验；同时注皿计金黄色葡萄球菌菌悬液菌数。
4.1.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体进行试验。
4.1.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基，按《中国药典》2015年版四部要求进行检验。
金黄色葡萄球菌方法适用性预试验常规方法结果见表2。
表2 金黄色葡萄球菌方法适用性预试验常规方法
注：1.+表示液体浑浊；-表示液体澄清或平板无菌落生长。
2.本次试验加入金黄色葡萄球菌85 cfu。
结果：采用《中国药典》2015年版四部148页金黄色葡萄球菌常规方法进行试验，未检出金黄色葡萄球菌，方法不可行。
4.2 薄膜过滤方法。
4.2.1 试验组。取氢万溶液1∶10的供试液10 mL加到pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜500 mL，加入金黄色葡萄球菌菌悬液1 mL（小于100 cfu），取出滤膜，加入100 mL胰酪大豆胨液体培养基，按《中国药典》2015年版四部147页金黄色葡萄球菌检查项进行试验。
4.2.2 阳性对照组。用金黄色葡萄球菌菌悬液1 mL替代试验样品溶液，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜500 mL，取出滤膜，加入100 mL胰酪大豆胨液体培养基，同时测定阳性对照菌数。
4.2.3 供试品对照组。取氢万溶液1∶10的供试液10 mL，加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜500 mL，取出滤膜，加入100 mL胰酪大豆胨液体培养基，按《中国药典》2015年版四部要求进行试验。
4.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基10 mL替代样品，薄膜过滤后取出滤膜，加入100 mL胰酪大豆胨液体培养基，进行培养、观察。
金黄色葡萄球菌方法适用性预试验薄膜过滤方法结果见表3。
表3 金黄色葡萄球菌方法适用性预试验薄膜过滤方法
注：1.+表示液体浑浊；-表示液体澄清或平板无菌落生长。
2.本次试验加入金黄色葡萄球菌63 cfu。
结果：采用《中国药典》2015年版四部148页金黄色葡萄球菌薄膜过滤方法进行试验，可以检出金黄色葡萄球菌，方法可行。