方法适用性建立
10.1 菌悬液制备、菌悬液数量测定同预试验方法。
10.2 需氧菌计数方法适用性试验。
10.2.1 试验组。分别取五味麝香丸1∶10供试液2 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜300 mL，最后一次冲洗液中分别加入金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升五味麝香丸1∶10供试液，含菌数小于100 cfu，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。
10.2.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，进行薄膜过滤，测定阳性对照菌数。
10.2.3 供试品对照组。取五味麝香丸1∶10供试液2 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每300 mL，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。
10.2.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基1 mL替代样品，进行阴性对照菌数测定。
10.3 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。
10.3.1 试验组。分别取五味麝香丸1∶10供试液2 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜300 mL，最后一次冲洗液中分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液，制成每毫升五味麝香丸1∶10供试液，含菌数小于100 cfu，取出滤膜，面朝上贴于沙氏葡萄糖脂培养基上，培养、计数。
10.3.2 菌液对照组。用菌悬液替代试验样品溶液，进行薄膜过滤，测定阳性对照菌数。
10.3.3 供试品对照组。用供试品替代试验组液体，进行试验。
10.3.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的稀释剂1 mL替代样品，测定阴性对照菌数。
计数方法适用性试验结果见表11。
表11 计数方法适用性试验
注：-表示平板无菌落生长。
10.4 耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希菌、沙门菌方法适用性，采用预试验方法进行试验，可以检出试验菌，方法可行。
十一、方法适用性确认试验结果
11.1 需氧菌计数方法适用性试验。分别取五味麝香丸1∶10供试液2 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，混匀，制成1∶10供试液，分别加到灭菌的三角瓶中，每瓶10 mL，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜300 mL，最后一次冲洗液中分别加入金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉0.1 mL菌悬液（小于1 000 cfu），制成每毫升五味麝香丸1∶10供试液，含菌数小于100 cfu，取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上，培养、计数。金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉回收率均在50%～200%，方法可行。
11.2 霉菌和酵母菌总数方法适用性试验。分别取五味麝香丸1∶10供试液2 mL加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，进行薄膜过滤，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每膜300 mL，最后一次冲洗液中分别加入白色念珠菌、黑曲霉的0.1 mL菌悬液，制成每毫升五味麝香丸1∶10供试液，含菌数小于100 cfu，取出滤膜，面朝上贴于沙氏葡萄糖脂培养基上，培养、计数。白色念珠菌、黑曲霉回收率均在50%～200%，方法可行。
11.3 大肠埃希菌。取五味麝香丸1∶10供试液10 mL加到灭菌的三角瓶中，加入大肠埃希菌菌悬液1 mL（小于100 cfu），加入300 mL胰酪大豆胨液体培养基，按《中国药典》2015年版四部147页大肠埃希菌检查项进行试验，可以检出试验菌，方法可行。
11.4 耐胆盐革兰阴性菌。取五味麝香丸1∶10供试液10 mL加到灭菌的三角瓶中，加入300 mL胰酪大豆胨液体培养基，在20～25℃培养2 h（不增殖），分别取培养物10 mL，分别加到100 mL肠道菌增菌液体培养基中，一瓶加大肠埃希菌菌悬液1 mL（菌数不大于100 cfu），另一瓶加入铜绿假单胞菌菌悬液1 mL（菌数不大于100 cfu），均置于30～35℃24～48 h，取每一瓶培养物接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基上，30～35℃18～24 h，培养，可以检出试验菌，方法可行。
11.5 沙门菌方法适用性试验。取五味麝香丸10 g加到灭菌的三角瓶中，加入300 mL胰酪大豆胨液体培养基，加入沙门菌菌悬液1 mL（小于100 cfu）于30～35℃培养18～24 h。取上述培养物0.1 mL接种至30 mL RV沙门增菌液体培养基中，于30～35℃培养18～24 h，划线于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板，于30～35℃培养18～24 h，按《中国药典》2015年版四部147页沙门菌检查项进行试验，可以检出试验菌，方法可行。