动物血液的采集方法
实验动物的采血方法很多，按采血部位不同，可分为：尾部采血、耳部采血、眼部采血、心脏采血、大血管采血等。具体而言，主要包括剪尾采血、鼠尾刺血、眼眶静脉丛采血、断头采血、心脏采血、颈静（动）脉采血、腹主动脉采血、股动（静）脉采血、耳缘剪口采血、耳静脉采血、后肢外侧小隐静脉采血、前肢内侧皮下头静脉采血、毛细血管采血、腋下采血等。选择什么采血部位与使用何种采血方法，需视动物种类、检测目的、试验方法及所需血量而定。不同动物采血部位与采血量见表1.3.4-2。
表1.3.4-2 不同动物采血部位与采血量
采血时，要注意以下几点：①采血场所有充足的光线；②室温夏季最好保持在25℃～28℃，冬季20℃～25℃为宜；③采血用具和采血部位一般需进行消毒；④若需抗凝血，应在注射器或试管内预先加入抗凝剂；⑤所需采血量应控制在动物的最大安全采血量范围内。一次采血过多或连续多次采血都可能影响动物健康，甚至导致贫血或死亡，必须予以注意。常见实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量见表1.3.4-3。
表1.3.4-3 不同动物的最大安全采血量和最小致死采血量（mL）
（一）眶静脉丛（窦）采血
当需要多次重复采血时，常使用本法。小鼠为眶静脉窦，大鼠为眶静脉丛。首先用乙醚将动物浅麻醉，采用侧眼向上固定体位。然后，左手拇、食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部（应防止动物窒息）。取血时，左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使头部静脉血液回流困难，眼球充分外突，眶静脉丛（窦）充血。右手持带7号针头的1mL注射器或长颈（3～4cm）硬质毛细玻璃管（内径0.5～1.0mm），将采血管与鼠成呈45°角，在泪腺区域内，用采血管由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。若为针头，其斜面先向眼球，刺入后再转180°角使斜面对着眼眶后界。刺入深度：小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。当达到蝶骨感到有阻力时，再稍后退0.1～0.5mm，边退边抽。然后将采血管保持水平位，旋转并后退吸引。由于血压的关系，血液即自动流入玻璃管中。得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时拔出采血管。为防止手术后穿刺孔出血，用消毒纱布压迫眼球30s。若手法得当，体重20～30g的小鼠每次可采血0.2～0.3mL，体重200～300g的大鼠每次可采0.4～0.6mL。左右眼交替使用，反复采血。间隔3～7d采血部位大致可以修复。采血中可使用微量检查用玻璃毛细管，或自制玻璃管（内径4～5mm的玻璃管加热后拉长至10～20mm，前端外径为1.4～1.8mm）。
（二）眶动脉和眶静脉取血
常用摘眼球法从眶动脉和眶静脉取血，本法多用于小鼠，所采血液为眶动脉和眶静脉的混合血，当需要采较大量血液时常用。该法可避免断头取血时因组织液混入所导致的溶血现象。操作时，首先用左手抓住动物颈部皮肤，并将动物轻压在实验台上，取稍侧卧位，左手拇食指尽量将动物眼周围皮肤往眼后压，使动物眼球突出充血后，用弯头眼科镊迅速夹去眼球，并将鼠倒置，头向下，眼眶内很快流出血液。让血液流入盛器，直至流完。如图1.3.4-14所示。此法由于取血过程中动物未死，心脏还在跳动，因此取血量多于断头法，一般可取约为小鼠体重4%～5%的血液量，是一种较好的取血方法。但该方法易导致动物死亡，只能一次采血，如需反复多次采血，则不能采用这种方法。
图1.3.4-14 小鼠摘眼球取血法
（三）尾静脉采血
需少量血时，常采用尾静脉采血，该方法主要用于大鼠、小鼠。
1.剪尾或切开尾静脉
剪尾时首先把动物固定或麻醉后，露出尾巴，将尾巴置于45～50℃热水中，浸泡数分钟，也可用酒精或二甲苯反复擦拭，使尾部血管扩张，擦干，剪去尾尖（小鼠约1～2mm，大鼠5～10mm），血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用吸管吸取。也可用试管等，自尾根部向尾尖按摩，血液会自尾尖流入试管。采用切开尾静脉法时，可用锐利刀片切开尾静脉一段，用试管等接住血液。如图1.3.4-15所示。该方法可反复多次使用。
图1.3.4-15 小鼠的剪尾采血法(https://www.daowen.com)
如需多次采取鼠尾静脉血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口上。使伤口形成火棉胶薄膜，保护伤口。也可采用切开尾静脉的方法采血，2根尾静脉可交替切割，并自尾尖向尾根方向切开，每次可取血0.2～0.3mL，切割后用棉球止血。这种方法在大鼠进行较好，可以在较长的间隔时间内连续采血，进行血常规检查。
2.针刺尾静脉
固定动物，消毒，擦干。操作时，在尾尖部向上数厘米处用拇指和食指抓住，对准尾静脉用注射针刺入后立即拔出。采血后用局部压迫、烧烙等方法进行止血。
（四）阴茎静脉采血
阴茎静脉采血在大鼠等动物中常用。具体方法可参考阴茎静脉注射。将雄性大鼠麻醉后仰卧或侧卧，翻开包皮，拉出阴茎，背侧阴茎静脉非常粗大、明显，沿皮下直接刺入采集血液。
（五）心脏采血
小动物因心脏搏动快，心腔小，位置较难确定，故较少采用心脏采血。操作时，将动物仰卧固定在鼠板上，剪去胸前区部位的被毛，用碘酒、酒精消毒皮肤。在左侧第3～4肋间，用左手食指摸到心搏处，右手持带有4～5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺。当针穿刺入心脏时，血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器。
心脏采血注意要点：
（1）要迅速而直接插入心脏，否则，心脏将从针尖移开；
（2）如第一次没刺准，将针头抽出重刺，不要在心脏周围乱探，以免损伤心、肺；
（3）要缓慢而稳定地抽吸，否则太多的真空反而使心脏塌陷。
若不需保留动物存活，也可麻醉后切开动物胸部，将注射器直接刺入心脏抽吸血液。操作时，先用乙醚等麻醉剂深麻醉动物后将其固定在鼠板上，剖开胸腔，然后将注射器针头刺入右心室后立即抽血。开胸时，要尽可能减少出血。
（六）大血管采血
大鼠、小鼠可从颈动（静）脉、股动（静）脉或腋下动（静）脉等大血管采血。在这些部位取血均需麻醉后固定动物，然后做动（静）脉分离手术，使其暴露清楚后，用注射器沿大血管平行方向刺入，抽取所需血量。或直接用剪刀剪断大血管吸取，但切断动脉时，要防止血液喷溅。
（七）腹主动脉采血
小鼠、大鼠还可以从腹主动脉采血。操作时，先用乙醚等麻醉剂对动物进行深麻醉，然后将动物仰卧位固定在橡胶板上，打开腹腔。开腹时，要尽可能减少出血。打开腹腔后，将肠管向左或向右推向一侧，然后用手指轻轻分开脊柱前的脂肪，暴露出腹主动脉。在腹主动脉远心端打一结，再用阻断器（或拉线）阻断股主动脉近心端，然后在其间平行刺入，并松开近心端的阻断，立即采血。也可在远心端不打结，只在近心端阻断，然后在髋总动脉分叉处向血管平行刺入，刺入后松开近心端阻断，立即抽血。抽血时，要注意保持动物安静。若动物躁动，要停止抽血，追加麻醉。
（王 芳）