【实验方法】

将对照组小鼠和荷瘤组小鼠分别脱臼处死，置于75%乙醇中浸泡5min取出，在超净工作台中解剖小鼠，无菌取出小鼠脾脏，用RPMI-1640培养液洗去血迹，减去筋膜，在200目筛网上研压过滤后将细胞收集于无菌管中，再轻轻加入到装有淋巴细胞分层液的离心管中，2000r/min，离心20min。用毛细管轻轻吸出单个核细胞层，再用RPMI-1640培养液离心洗涤一次，用RPMI-1640完全培养液调整细胞数为1×106/mL。取细胞悬液每孔100μL加入96孔培养板中，每个样设8个平行孔。其中4孔加ConA（终浓度为5μg/mL）100μL，4孔加RPMI-1640完全培养基100μL。置37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱培养72h。实验终止前4h每孔加入MTT溶液10μL继续孵育至所需时间，小心弃去上清液，每孔加DMSO150μL，振荡器振荡均匀，用波长490nm酶标仪测定每孔的OD值。(https://www.daowen.com)