三、检测方法
寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应,目前主要采用病毒核酸检测。
开展蚊媒寨卡病毒检测时,主要对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测和病毒分离。
开展寨卡病毒实验室检测时,应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染的可能性。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。
(一)临床标本检测
1.病原学检测
病原学检测主要适用于急性期血液标本,一般认为发病7天内检测阳性率高。
(1)核酸检测
一般采用荧光定量RT-PCR方法,是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段,可采用中国疾病预防控制中心病毒病所发放的荧光定量PCR试剂或其他商品化试剂盒进行检测。
(2)病毒分离
将标本接种于蚊源细胞(C6/36)或哺乳动物细胞(BHK21、Vero)进行分离培养,出现病变或5~7天以后,用检测核酸的方法鉴定病毒,也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。
2.血清学检测
(1)血清特异性IgM抗体(https://www.daowen.com)
发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体,但发病7天后检出率高,可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应,易于产生假阳性。
(2)中和抗体
一般采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染,可以确诊。
3.其他标本检测
尿液、唾液和精液标本的检测可用血清病毒RNA提取试剂盒及核酸特异性检测试剂进行检测,结果判定同血清标本。
(二)媒介标本检测
1.标本处理
将分类后的伊蚊成蚊或幼虫,按照采集地点,每10~20只为1份进行研磨处理。
2.病毒核酸检测
用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测。
3.病毒分离
病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。