实验一 显微镜的使用和基本组织的观察
【实验目的】
(1)熟悉显微镜的构造和使用。
(2)观察四大基本组织的形态结构。
【实验时间】
2学时。
【实验内容】
1.实验原理 光学显微镜一般由载物台、聚光照明系统、物镜、目镜和调焦机构组成。载物台用于承放被观察的物体。利用调焦旋钮可以驱动调焦机构,使载物台进行粗调和微调的升降运动,使被观察物体清晰。它的上层可以在水平面内沿进行精密移动和转动,一般都把被观察的部位调放到视场中心。聚光照明系统由灯源和聚光镜构成,聚光镜的功能是使更多的光能集中到被观察的部位。照明灯的光谱特性必须与显微镜接收器的工作波段相适应。
物镜位于被观察物体附近,是实现第一级放大的镜头。在物镜转换器上装着几个不同放大倍率的物镜,转动转换器就可让不同放大倍率的物镜进入工作光路,物镜的放大倍率通常为5~100倍。物镜是显微镜中对成像质量优劣起决定性作用的光学元件,一般变倍比为6.3∶1。常用的有能对两种颜色的光线校正色差的消色差物镜;质量更高的还有能对三种颜色的光校正色差的复消色差物镜;能保证物镜的整个像面为平面,以提高视场边缘成像质量的平像场物镜。高倍物镜中多采用浸液物镜,即在物镜的下表面和标本片的上表面之间填充折射率为1.5左右的液体,它能显著提高显微观察的分辨率。
目镜是位于人眼附近实现第二级放大的镜头,目镜放大倍率通常为5~20倍。按照所能看到的视场大小,目镜可分为视场较小的普通目镜和视场较大的大视场目镜(或称广角目镜)两类。载物台和物镜两者必须能沿物镜光轴方向做相对运动以实现调焦,获得清晰的图像。用高倍物镜工作时,容许的调焦范围往往小于微米,所以显微镜必须具备极为精密的微动调焦机构。显微镜放大倍率的极限即有效放大倍率,显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距。分辨率和放大倍率是两个不同的但又互有联系的概念。显微镜构造见图2-17。
2.实验材料 显微镜、单层扁平上皮装片、疏松结缔组织装片、骨骼肌纵横切装片、运动神经元装片、纱布、擦镜纸。
【实验步骤】
(1)实验分组。
(2)实验原理讲解。
(3)实验报告要求。
(4)显微镜操作/观察。
①安装显微镜。
②检查。
图2-17 显微镜构造
③对光。
④调焦。
⑤低倍镜(10倍)观察。(https://www.daowen.com)
⑥高倍镜(40倍)观察。
(5)图像采集。
(6)结果观察:上皮为假复层纤毛柱状上皮,由纤毛细胞、杯状细胞、基细胞、刷细胞和弥散神经内分泌细胞构成。
①纤毛细胞:纤毛细胞(ciliated cell)为上皮中数量最多的细胞,胞体呈柱状,游离面有纤毛。纤毛向咽部定向摆动可将黏液及其黏附的尘埃和细菌等异物推向咽部,然后咳出,因而纤毛细胞有清除异物和净化吸入空气的作用。吸入有害气体或患慢性支气管炎时,均能使纤毛减少、变形、膨胀或消失。
②杯状细胞:杯状细胞(goblet cell)散在于纤毛细胞之间,其分泌的黏液覆盖在黏膜表面,与气管腺的分泌物共同构成黏液屏障,可黏附和溶解气体中的尘埃颗粒、细菌和其他有害物质。
③基细胞:基细胞(basal cell)位于上皮的深部,细胞矮小、锥体形,细胞顶部未到达上皮游离面。基细胞是一种未分化的细胞,有增殖分化的能力,可分化形成纤毛细胞和杯状细胞。
④刷细胞:刷细胞(brush cell)为无纤毛柱状细胞,游离面有许多长而直的微绒毛。胞质内粗面内质网发达,无分泌颗粒。此种细胞的功能尚无定论,有人认为是过渡阶段的细胞,可分化为纤毛细胞,也有人发现细胞的基质面与传入神经末梢形成上皮树突突触,故认为刷细胞具有感受刺激的功能。
【实验提示】
(1)搬动显微镜时,要一手握镜臂,一手扶镜座,两上臂紧靠胸壁。切勿一手斜提,前后摆动,以防镜头或其他零件跌落。
(2)观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5 cm),以免显微镜翻倒落地。镜柱与镜臂间的倾斜角度不得超过45°,用完立即还原。
(3)使用时要严格按步骤操作,熟悉显微镜各部件性能,掌握粗、细准焦螺旋转动方向与镜筒升降关系。转动粗准焦螺旋向下时,眼睛必须注视物镜头。
(4)观察带有液体的临时标本时要加盖玻片,以免液体污染镜头和显微镜。
【实验思考】
比较四大基本组织的形态特点?
目标检测
简答题
1.简述化学突触的电镜结构。
2.简述神经元的分类(至少列举3类)。
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