实验三　实验性急性肺水肿

实验三　实验性急性肺水肿

【实验目的】

（1）制备急性肺水肿的疾病模型，观察动物表现，探讨该病的病因和发病机制。

（2）结合急性肺水肿的病因、发病机制，探讨急性肺水肿的防治原则。

【实验对象及材料】

（1）实验动物：小鼠（雄性，4～6周龄，18～22 g）。

（2）实验材料：电子秤，分析天平，黑色记号笔，棉签，注射器，培养皿，玻璃分针，直剪，眼科剪，眼科镊，弯止血钳，吸水纸，细棉线，持针器及皮肤缝合针线，小鼠灌胃针。

（3）实验试剂：重酒石酸去甲肾上腺素注射液（1 ml∶2 mg），呋塞米（规格：2 ml∶20 mg），生理盐水。

【实验步骤和检测指标】

（1）肺水肿模型的制备及防治：动物编号、称重、分组。

1）正常组：可以全班共用1只正常鼠。

2）模型组：腹腔注射去甲肾上腺素注射液（0.4 ml/20 g）。

3）防治组1：腹腔注射去甲肾上腺素注射液（0.4 ml/20 g）后，立即呋塞米灌胃（0.4 ml/20 g）。防治组2：腹腔注射去甲肾上腺素注射液（0.4 ml/20 g）后，立即呋塞米腹腔注射（0.4 ml/20 g）。

附：小鼠每次灌胃容积不超过0.4 ml/10 g，最大为1 ml/只。按照人与动物之间的用药剂量换算：小鼠用药的等效剂量（mg/kg）= 成人的每日用量mg/60 kg×10倍。

（2）临床指标：观察小鼠一般表现（安静或活跃，呼吸平稳或困难，口唇颜色，口鼻有无泡沫状液体流出）；造模20 min后，记录小鼠呼吸频率，存活时间（若20 min内不死亡，记录存活时间＞20 min）。

（3）病理学指标

1）取材和计算肺系数：动物死亡后（造模20 min后，颈椎脱臼法处死小鼠），用镊子轻提剑突，直剪紧贴胸骨剪断胸肋关节，沿边缘剪开横膈膜，打开胸腔。颈部分离气管，在气管杈上方约0.5 cm处用粗棉线结扎气管（防止肺内水肿液流出），在结扎线的上端剪断气管，借粗棉线轻提气管连带的胸腔脏器，仔细将胸腺、心脏与肺分离。将肺放在培养皿内，吸水纸吸去其表面的水分；剪去结扎气管的粗棉线，称取肺重量，计算肺系数=肺重量（g）/体重（g），并与正常小鼠的肺系数比较。(https://www.daowen.com)

2）形态学观察

肉眼观察：肺的体积和颜色变化；肺表面及切面是否有地图样的淤血及出血斑块。轻压肺脏，观察是否有泡沫状液体流出。

镜下观察：肺组织切片的形态学变化。

（4）术后缝合：实验动物术后伤口缝合。

【注意事项】

（1）去甲肾上腺素注射液见光易变质，故需现配现用。

（2）分离时注意不要损伤肺组织，以免液体流出、肺组织不完整等影响肺系数的准确性。

【实验结果】

正常肺

水肿肺

【实验讨论】

（1）请结合实验结果分析本次实验造模是否成功？理由是什么？

（2）临床哪些疾病可以导致肺水肿？如何判断肺水肿患者是否发生了呼吸衰竭？

（3）根据肺水肿的病因和发生机制，设计肺水肿的防治原则。