2.3.2 甘油整体封固法
甘油整体封固法利用甘油脱水和透明，将材料封固于甘油中，操作简单并可保持植物的自然色泽。对于制作含有色素的材料（如绿藻）效果较好，必要时还可进行染色。这里以藻类植物水绵为例，分别介绍不染色和染色的整体封固制片技术。
1.不染色的封片
（1）材料收集和处理：采集新鲜水绵，取水绵丝状体放在培养皿中，加10％甘油，盖上滤纸以防灰尘降落于其上，把培养皿置于较温暖的地方，让它慢慢蒸发至不含水分，这样甘油就逐渐取代材料中的水分，最终使材料透明。
（2）装片制作和封固：用镊子取少许透明好的水绵，放在载玻片中央，将材料展开，在显微镜下镜检，如果材料无收缩或变质，可以继续进行封固操作，即在材料上滴加一小滴纯甘油，将丝状体分散开，盖上盖玻片。封片时如果甘油多到从盖玻片边缘溢出，则会影响下一步封固，此时可将盖玻片移开，用滴管将多余的甘油吸掉，重新加盖玻片，最后用较稠的加拿大树胶沿盖玻片四周封边。
2.染色的封片
（1）采集新鲜水绵置于离心管中，加入铬酸-醋酸弱固定液固定12～24 h。
（2）将材料放在培养皿中，用自来水冲洗5～6次，然后用蒸馏水洗一次。
（3）把材料移入离心管中，加1％曙红水溶液染色约12 h，或用铁矾-苏木精染色。
（4）用蒸馏水把多余的染料洗去，在显微镜下观察。如果染色不够，可重复染色；如果染色过度，则可放在1％～2％醋酸溶液中分色至合适的程度。
（5）将材料放在培养皿中，加10％甘油，盖上滤纸，按照前述方法进行装片和封固。
甘油操作时要注意：①材料不宜放在温度过高的地方，否则水分蒸发速度太快，导致材料收缩；②加入10％甘油的体积不能少于材料体积的10倍，这样在蒸发至不含水分时仍能保证甘油浸润材料；③封片时，不宜放置太多材料，并注意将丝状体分开，避免材料重叠，影响观察效果。
3.甘油冻胶封固
对于不易收缩的材料（如植物花粉粒），制片时可用此方法。其特点是操作方便，易于制片，方法是把配好的甘油冻胶用热水浴使之熔化，在载玻片上滴加一滴甘油冻胶，用镊子取下花的雄蕊，把少量花粉粒撒在甘油冻胶上，然后加盖玻片封固。如果对观察效果不满意，还可以把制作好的封片在酒精灯上微热，使甘油冻胶熔化，用手轻轻移动盖玻片，使花粉粒在冻胶中转动，这样更容易观察到花粉粒的不同面的形态。