【实验原理】

一、Feulgen反应（DNA染色）的原理

DNA是由许多单核苷酸聚合成的多核苷酸，每个单核苷酸又由磷酸、脱氧核糖和碱基构成。DNA经1 mol/L盐酸水解，其嘌呤碱和脱氧核糖之间的键被打开，使脱氧核糖的第一碳原子上形成游离的醛基，这些醛基可与Schiff试剂反应。Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸钠作用形成的无色品红溶液，Schiff试剂与醛基结合可形成紫红色的化合物。因此，凡有DNA的地方，Feulgen反应都能显示紫红色。紫红色的产生是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色基团，所以具有颜色。若样品不经过水解或预先用热的三氯醋酸或DNA酶处理，得到的反应是阴性的，以此可以证明Feulgen反应具有专一性。(https://www.daowen.com)

二、Brachet反应（RNA染色）的原理

甲基绿-派洛宁（methyl green-pyronin）是碱性染料，与细胞内DNA、RNA结合会呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿和染色质中的DNA选择性结合显示绿色或蓝色，派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料在混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子虽然都是多聚体，但其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色，派洛宁易与聚合程度较低的RNA结合呈现红色，但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。因此，RNA与派洛宁亲和力大，易被染成红色；DNA与甲基绿亲和力大，易被染成蓝绿色。