【实验方法】
1.取小白鼠肝边沿较薄的组织块,放入盛有Ringer氏溶液的培养皿中,洗去血液。
2.将1/5 000Janus green B倒入另一个培养皿中,将肝组织块移入其内,不可将组织块完全淹没,要让组织块上面部分半裸露在染液外面,这样可使细胞内线粒体的酶系得到充分氧化,线粒体更易染色。一般染色30~40 min(组织块边缘染成蓝绿色即可)。
3.染色后,同时用左右两只手拿两根解剖针,一只手的解剖针压住组织块,另一只手的解剖针稍稍用力拉组织块边缘,就会有一些肝细胞或细胞群和组织块分离。(https://www.daowen.com)
4.用吸管将分离的肝细胞吸起,放在载玻片中央的Ringer氏溶液中。垫两根头发,盖上盖玻片。注意Ringer氏溶液不要太多。
5.用油镜观察时,可不断地上下微调螺旋,使盖玻片上下稍稍移动,这样肝细胞中的线粒体能接触到充足的氧气,使线粒体的染色非常清楚。