【实验步骤】

1.捣髓法取蟾蜍血，即用解剖针捣毁蟾蜍的脑组织和脊髓后取血。具体操作是，左手握住蟾蜍的身体和四肢，使其腹部贴着掌心，食指压住蟾蜍的头部前端使其尽量腹屈。在蟾蜍的头和躯干之间可触及一凹陷（枕骨大孔所在处），右手持解剖针直插入凹陷处1～2 mm，随即将针尖转向头侧插入颅腔内捣毁脑组织，然后将解剖针抽回并转向尾侧刺入脊髓管内捣毁脊髓，如此直至蟾蜍四肢松软，呼吸消失为止。将蟾蜍腹面向上放入蜡盘中，剪开胸腔，打开心包，小心将心脏剪一小口，取心脏血1滴滴在干净的载玻片一端，推片。按以上方法制备2张涂片，室温下晾干。

2.新鲜血涂片自然干燥10 min，放入70%乙醇溶液中固定10 min。

3.取出晾干后放入70～90℃的5%三氯醋酸溶液中15～20 min。

4.用冷的5%三氯醋酸溶液漂洗后，蒸馏水水洗3次，每次5 min。(https://www.daowen.com)

5.分别插入染色液中染色，酸性固绿染色液染色10 min，碱性固绿染色液染色35 min。

6.取出血涂片，蒸馏水冲洗。

7.风干，二甲苯透明2 min，树胶封片。

8.观察结果。