3.6.1 动物试验和组织病理学检查方案

3.6.1 动物试验和组织病理学检查方案

对两只健康的雄性比格犬进行胸主动脉夹层修复手术。覆膜支架植入过程与患者的TEVAR相似[17]。在近端着陆区,1号犬和2号犬的主动脉直径分别为16.4 mm和16.5 mm。覆膜支架由镍钛合金环和单丝涤纶(PET)覆膜制成,覆膜支架直径和长度分别为20 mm和80 mm,近端支架放大率分别为22%和21.2%。两例TEVAR手术均在全身麻醉和剖腹下成功进行。考虑到覆膜支架的输送系统,覆膜支架从腹主动脉进入。腹主动脉用5F鞘管和猪尾导管进行血管造影。定制的Fabulous(DiNova,中国)覆膜支架被植入降主动脉段。最后进行血管造影以确认手术的成功,取鞘后用血管缝合线修复手术部位。在1号犬中,将覆膜支架近端裸支架释放在弓降段,近端裸支架限制在降主动脉。在2号犬中,覆膜支架近端裸支架植入距近端5 mm位置处。金属头端位于主动脉分支口,近端裸支架释放后不局限于降主动脉内。两例患者在近端释放位置的距离差异为5 mm,两种不同的覆膜支架着陆位置是临床实践中最常见的TEVAR场景。本研究经复旦大学附属中山医院伦理委员会批准。

对覆膜支架植入后的犬进行CTA检查。CTA使用320排CT扫描仪进行,注射造影剂(1 ml/kg,Ultravist 370,Bayer Healthcare AG,德国)的流速为3~4 ml/s。利用医学图像处理软件MIMICS 15.0导入DICOM标准格式的断层数据进行图像分割。在图像分割时,选取CT值的阈值为226,这一取值能够清楚地分辨出血管和周围组织。对每个CT断层图像应用阈值分割技术,以识别出主动脉。对于高强度结构,如内膜瓣和脊柱,对比前图像识别出这些区域,随后从管腔分割中删除。最后对每个分割好的切片进行检查并在必要时进行手动校正。在覆膜支架植入的位置测量主动脉近端直径,作为选择覆膜支架规格的依据。(https://www.daowen.com)

在主动脉夹层修复手术3个月后对两只犬实施安乐死,并采集主动脉进行组织病理学检查。整个胸主动脉用4%多聚甲醛固定24 h,然后纵向打开,并小心地从主动脉壁移除。与TEVAR有限元仿真相对应,从每个主动脉的三个节段中选择组织样本:具有血管最大米塞斯应力的近端着陆区、覆膜支架中部位置和无支架植入段。取样后,石蜡包裹,切片(5 μm厚),通过HE染色法和天狼星红染色法两种染色方法检测组织病理学的变化。