动物实验的基本操作技术
（一）实验动物的抓取与固定
1.青蛙和蟾蜍
青蛙和蟾蜍的抓取方法通常是用左手将动物贴紧在手掌中，并以左手食指和中指夹住其左、右前肢，以左手无名指与小指夹住其后肢，以拇指按压其头部，右手持毁髓针，从枕骨大孔刺入，以破坏脑和脊髓。蛙类固定分为俯卧位与仰卧位两种。规范的固定方法是使用蛙腿夹和蛙板，操作简单。将蛙腿夹套在蛙四肢的腕关节和踝关节处，拉紧四肢将其插入蛙板上的小孔内即可。如果没有蛙腿夹，可用大头针，采取俯卧位或仰卧位将其钉在蛙板上。
2.小白鼠
小白鼠性情较温顺。抓取方法通常是用右手拇指、食指及中指提起小白鼠尾部，将其放在鼠笼盖或粗糙桌面上。在小白鼠爬行时，迅速用左手拇指、食指抓住其两耳和颈部的背部皮肤，再以左手无名指、小指及掌心拇指侧夹住腹背部皮肤和尾部，将小白鼠固定控制住。在需要抽取尾部血或尾静脉注射给药时，可将小白鼠装入特制的小白鼠固定盒内。
3.大白鼠
大白鼠的抓取法基本同小白鼠，但大白鼠在惊恐、激怒时易将操作者手指咬伤，故在抓取时左手应先戴上防护手套，再用右手抓住尾巴，放在粗糙面上。待大白鼠爬行时，用左手拇指和食指迅速捏住耳后及前颈的背部皮肤，其余手指与手掌握住背部和腹部。对于身体特大或凶狠易咬人的大白鼠，可以先用厚布巾包裹大白鼠全身，只露出大白鼠的口鼻部，然后进行抓取操作。有时也可将其固定于特制的大白鼠固定器内。
4.豚鼠
豚鼠性情较为温和，一般不咬人，只需用手轻轻握住身体即可抓起。
5.家兔
捉拿时可一手抓住其颈背部皮肤，轻轻将兔提起，用另一手托住其臀部和后肢。其爪较尖利，应防止被其抓伤。注意不应该采取抓提兔子的双耳、腰部或四肢的方法，以免造成双耳、颈椎或双肾的损害。
6.狗
为避免狗咬人，可由一人用捕犬叉按压住狗的颈部，使其无法动弹，另一人用一粗棉带绑住狗的嘴巴，使其不能咬人。绑嘴的方法是将粗棉带先绕上下颌一周，在上颌上打一次结；然后绕向下颌，再打一次结；接着将粗棉带拉至头后颈背上打第三次结，在此结上须再打一活结以牢固固定其嘴巴。
（二）实验动物的麻醉
麻醉的目的主要是在实验或手术过程中减少动物的疼痛，减少其挣扎，保证实验的顺利进行。在应用麻醉剂时，需根据动物的种类以及实验或手术的性质慎重加以选择。麻醉状态必须适度，过深或过浅都会给手术或实验带来不良影响。麻醉的深浅可从呼吸强度、某些反射的有无、肌肉的紧张度和瞳孔的大小加以判断。适度的麻醉状态是呼吸深、慢而平稳，角膜反射消失，肌肉松弛。
1.麻醉方法的分类
麻醉的方法根据麻醉药作用的范围，分为局部麻醉和全身麻醉。
局部麻醉常用的药品是1%普鲁卡因溶液。局部麻醉在机能学实验中很少应用。
全身麻醉根据使用的途径，分为吸入麻醉和注射麻醉。吸入麻醉应用的药品主要是乙醚。乙醚适用于各种动物，但有刺激呼吸管分泌黏液的作用。为防止呼吸管堵塞，可用硫酸阿托品肌内注射。吸入麻醉常用于小白鼠和大白鼠实验。实验时把乙醚浸过的脱脂棉布放置在麻醉用的透明容器（如烧杯）内，容器加盖，同时放入鼠类，经过15～20min后动物即进入麻醉状态。
注射麻醉常用的方法有静脉注射麻醉和腹腔注射麻醉等。
（1）静脉注射麻醉：这是全身麻醉的一种常用方法。常用静脉注射麻醉狗、兔。注射方法因动物类型而异。兔的静脉注射常用部位为耳缘静脉。耳缘静脉沿耳背内侧走行。操作时先用左手中指和食指轻轻夹持兔耳近根部，用左手拇指和无名指固定兔耳，将左手无名指放置在其下作垫，待静脉显著充盈后，右手持注射器刺入耳缘静脉。顺着血管走行方向刺入静脉1cm后，放松对耳根处血管的压迫，轻轻推动针栓以注射麻醉药。若注射时感觉有阻力或出现局部皮肤发白、隆起现象，提示针头未入血管，应立即拔出针头，更换注射点重新注射。首次注射时应从静脉的远心端开始，逐渐移向近心端，进行反复多次注射。
狗的注射给药部位通常是后肢外侧的小隐静脉或前肢内侧的头静脉。注射时，先固定狗的头部以防其咬人，然后在注射部位剪毛，一人用手握紧静脉近心端处，使静脉充盈，另一人将注射针头刺入静脉，回抽有血后即松开双手，注入麻醉药。
（2）腹腔注射麻醉：大白鼠、小白鼠麻醉时常用。给药时由操作者先按照前述方法用左手单手固定实验鼠，即用左手拇指与食指捏住鼠耳及颈背部皮肤，无名指与小指夹持住鼠尾，腹部朝上固定于手掌间，右手持注射器从左后腹部向头的方向刺入腹腔，回抽无血后注射给药。狗、兔等较大动物腹腔注射麻醉时，需由至少两人合作操作。
（3）其他注射麻醉法：两栖类动物可采用淋巴囊注射麻醉。此外，还有肌内注射麻醉等。
2.注射麻醉时常用的麻醉药(https://www.daowen.com)
（1）戊巴比妥钠：常配制成3%的水溶液进行静脉注射或腹腔注射，其中狗、兔的给药剂量为30mg/kg（体重），大白鼠、小白鼠的给药剂量为40mg/kg（体重）。静脉注射时，药品的前1/3剂量可推注，以快速通过兴奋期；后2/3剂量则应缓慢注射，以免过量。
（2）氨基甲酸乙酯：又名乌拉坦。常配制成20%～25%的溶液进行静脉注射或腹腔注射，其中狗、兔的给药剂量为1g/kg（体重），大白鼠、小白鼠的给药剂量也可为1g/kg（体重）。在家兔急性实验中较为常用，而在狗实验中麻醉生效慢。
（3）氯醛糖：水中溶解度较小，常配制成1%的水溶液。配制时可适当加热以助溶，不可煮沸。在狗、兔、大白鼠、小白鼠中使用的剂量为80mg/kg（体重）。
（三）实验动物的取血
1.断头取血
此法适用于大、小白鼠类在处死时的取血。取血时，操作者用左手固定鼠颈部，使其头略为下倾；右手持剪刀，从鼠颈部剪掉鼠头，收集鼠颈部切口处流出的血液。
2.剪尾取血
此法适用于大、小白鼠类采取少量血样时。取血前可先用酒精涂擦或用温水浸泡，以使鼠尾血管扩张充血，然后剪去尾尖（小白鼠1～2mm，大白鼠5～10mm），即可流出血液。如血流不畅，可用手轻轻从尾根部向尾尖部挤压数次，可取得数滴血液。
3.眼眶后静脉丛取血
此法适用于大、小白鼠类取血。操作时用左手从背部固定动物，以食指和拇指握住其颈部，利用对颈部所施加的轻压力，使头部静脉血液回流困难，使眼球突出；右手将消毒过的玻璃吸管尖端迅速插入其内侧眼角，并轻轻由鼻侧眼眶壁平行地对着喉头方向推进4～5mm，即到眼眶后静脉丛。玻璃吸管取水平位，稍加吸力，血液便流出，收集眼眶内流出的血液。采血前玻璃吸管用肝素生理盐水湿润，防止血液凝固。
4.心脏取血
将动物仰卧固定后，剪去心前区胸壁的毛，用碘酒、酒精消毒此处皮肤。在左侧第3～4肋间用左手食指摸到心搏后，右手持注射器于心尖搏动（心尖冲动）明显之处刺入心室。当针头正确刺入心脏时，动物血由于本身的压力自动进入注射器。如认为针头已进入心脏，但抽不出血液，可把针头稍微退出或前进一些。此法要求操作者动作迅速、轻巧，针刺部位准确，抽吸时要缓慢而稳定。
5.静脉取血
兔子可经耳缘静脉、颈静脉取血。可采用注射器进行静脉穿刺取血，也可采用静脉插管后取血。浅表静脉可经酒精消毒后直接用刀片切开静脉取血。狗可经后肢小隐静脉或前肢皮下头静脉进行静脉穿刺取血。
6.动脉取血
如颈动脉取血时，可先做颈动脉分离术，再将注射针头沿向心方向平行刺入颈动脉，抽取所需血量。此法也可选用股动脉。
（四）实验动物的处死
1.脊椎脱臼法
本法最常用于小白鼠。用左手拇指和食指压住小白鼠头的后部，右手抓住鼠尾巴，用力向右后上方拉扯，使其颈椎脱臼，小白鼠瞬间死亡。
2.断头法
本法常用于鼠类，即用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。断头鼠由于被剪断了颈髓及大量失血而死亡。
3.气体栓塞法
本法适用于大动物的处死，即使用注射器将空气快速注入静脉，使动物发生血管内气体栓塞（尤其是肺动脉栓塞）而死。兔选用耳缘静脉，狗选用前肢或后肢皮下静脉注射。兔静脉内注入20～40mL空气，狗静脉内注入80～150mL空气可致死亡。
4.放血致死法
放血致死法是指动物经动脉或静脉一次大量放血而致死的方法。麻醉好动物后，将其固定于手术台上，先行股动脉分离术，向心端用动脉夹夹住，插入一根塑料管，并固定好，打开动脉夹放血。此法对内脏器官无损伤，狗、兔均可采用此法处死。