【实验方法与步骤】
1.手术准备
(1)麻醉、固定:将家兔称重后,由兔耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙酯溶液(5mL/kg(体重))。注射过程中注意观察家兔的角膜反射、四肢肌张力、呼吸和疼痛反射。将家兔麻醉后取仰卧位固定于兔手术台上。
(2)颈部手术:
①颈前部剪毛,从甲状软骨沿颈正中线切开皮肤7~8cm,逐层钝性分离皮下组织、肌肉,充分暴露气管和气管旁的血管神经束。在气管两侧寻找颈总动脉、颈迷走神经干、交感神经、降压神经。先仔细识别3条神经,其中迷走神经最粗,交感神经较细,降压神经最细,且常与交感神经紧贴在一起。然后将每条神经各分离出2~3cm,并在它们下方分别穿过一根颜色不同的经生理盐水浸湿的丝线以便区分和备用。神经分离完后,再用玻璃分针小心分离出颈总动脉2~3cm,其下穿线备用。
②插气管插管:在甲状软骨3~4软骨环上作横切口,再向头端作纵切口,使切口呈倒T形,向胸腔方向插入气管插管,用线结扎固定。
③插入动脉插管:找到分离出来的左侧颈总动脉,下方穿两根备用线,用一根线将左侧颈总动脉的远心端(尽量靠头端)用线扎牢,近心端用动脉夹夹闭。用眼科剪在结扎线的近端剪一V形小口,沿向心方向插入已注满肝素生理盐水的动脉插管(注意事先排除管内的气泡,以免影响血压记录效果),利用备用线将动脉插管与动脉扎紧,并固定。
2.仪器连接
(1)将动脉插管与压力换能器的直管通过三通管相连,使压力换能器腔、动脉插管和大气相通,从压力换能器的侧管处三通管注入肝素生理盐水,排除气体,关闭此三通管。
(2)将压力换能器的输入端与BL-420I系统的前面板通道1接口相连,将刺激电极插头与BL-420I系统的前面板刺激接口相连。
3.启动信号采集与分析系统
打开BL-420I系统,选择“实验模块”→“循环”→“动脉血压调节”实验模块。松开动脉夹,记录动脉血压。
4.心血管活动的神经、体液调节实验(https://www.daowen.com)
(1)先描记一段正常血压曲线,并在记录的血压曲线上做好标记。一级波(心率波)频率与心率一致,幅度表示脉压,二级波(呼吸波)与呼吸周期有关。
(2)牵拉颈总动脉:用手拉住连接压力换能器一侧颈总动脉上方结扎线,向下牵拉(或用手指在下颌角处沿颈总动脉走行方向向头侧深处压迫颈动脉窦),观察血压、心率的变化。
(3)夹闭颈总动脉:在右侧颈总动脉下穿线,提起结扎线,用动脉夹夹闭,使颈总动脉血流停止5~10s,观察此时对动物的血压及心率的影响。
(4)待动物的血压及心率恢复稳定后,从耳缘静脉注射10-4肾上腺素溶液0.2~0.3mL,观察肾上腺素对血压及心率的影响。
(5)待动物的血压及心率恢复稳定后,再通过耳缘静脉注射10-4乙酰胆碱溶液0.2~0.3mL,观察乙酰胆碱对血压及心率的影响。
(6)在降压神经上作两处结扎,在两结扎线间剪断降压神经,用连续电刺激降压神经的中枢端和外周端,以观察电刺激降压神经对血压及心率的影响。
(7)在右侧迷走神经上作两处结扎,在两结扎线间剪断迷走神经。用连续电刺激迷走神经的外周端,以观察电刺激迷走神经的外周端对血压及心率的影响。
(8)观察刺激交感神经对耳血管网密度的影响:
①先观察、比较两侧耳朵的血管直径和血管网密度;
②结扎剪断右侧交感神经后,比较两耳血管的扩张程度和血管网密度;
③用连续电刺激右侧颈交感神经的头侧端(外周端),再比较两耳上述指标有无改变。