【实验方法与步骤】
1.麻醉与手术
(1)麻醉、固定:将家兔称重,从耳缘静脉注入20%氨基甲酸乙酯溶液(5mL/kg(体重))麻醉后,将其仰卧固定于兔手术台上。(麻醉过程中注意观察家兔肌张力、呼吸频率及角膜反射的变化。)
(2)分离左侧颈总动脉和右侧颈外静脉:颈前部剪毛,沿颈正中线作长为5~7cm的切口,逐层分离皮下组织、肌肉,充分暴露气管,分离左侧颈总动脉和右侧颈外静脉,并各穿两根细线备用。
(3)颈静脉插管:插管前,将充盈肝素生理盐水的静脉插管用三通管连接中心静脉压测定装置和静脉输液装置。经耳缘静脉注入肝素生理盐水(1mL/kg(体重))后,将右侧颈外静脉远心端结扎,在靠近结扎点的近端用眼科剪沿向心方向作一切口,再将备好的静脉插管由此切口沿向心方向插入颈静脉,结扎固定。
(4)颈总动脉插管:将左侧颈总动脉的近心端用动脉夹夹闭后,远心端用细线扎牢。用眼科剪在结扎处的近端沿向心方向剪一切口,然后向心脏方向插入与压力换能器相连的充满肝素生理盐水的动脉插管,用细线将动脉插管与动脉扎紧并固定。然后将压力换能器输入端与BL-420I系统的通道1接口相连。
2.启动信号采集与分析系统(https://www.daowen.com)
打开BL-420I系统,在功能区“实验模块”的“循环”下拉菜单中选择“动脉血压调节”,然后松开动脉夹,记录动脉血压。根据信号窗口中显示的波形,适当调节实验参数以获得最佳的实验效果。
3.观察项目
(1)完成手术操作和设备连接后,先让家兔静卧数分钟,待记录的动脉血压曲线和中心静脉压值稳定后,记录下此时的动脉血压、中心静脉压、心率和呼吸频率等,以上指标用作心功能不全实验的对照。其中中心静脉压采用水检压计测量技术:给水检压计注入生理盐水,排出管道中的气泡,使液面在10cmH2O刻度附近,用螺旋夹夹闭管道。上下调节水检压计位置,使水检压计的“0”位与被测动物心房处于同一水平面上,松开螺旋夹,见液面随呼吸波动,此时液面高度即为中心静脉压值。
(2)用2mL注射器抽取碳素墨水后,按1.0mL/kg(体重)剂量,经家兔耳缘静脉缓慢注入。注射时密切观察动物血压、中心静脉压和呼吸频率,当动物血压开始下降时,立即停止注射,并检测上述各项指标。注射碳素墨水后观察5min,再检测各项指标一次。
(3)通过静脉插管快速输入生理盐水200mL,输液速度为连滴呈线状。输液过程中注意观察上述各项指标的变化。若输液已经达到200mL/kg(体重),而动物各项指标的变化不显著,可再补充注入碳素墨水,直至上述各项指标的变化非常显著或动物死亡。
(4)动物死亡后,可进行尸体解剖,观察有无胸腔积液、腹腔积液,注意心、肺、肝脏的外观和切面观变化,肠系膜血管充盈情况,以及肠壁有无水肿情况。