【实验方法与步骤】

【实验方法与步骤】

1.手术操作

（1）麻醉和固定：将家兔称重，用20%氨基甲酸乙酯溶液5mL/kg（体重）经耳缘静脉注射麻醉后，仰位固定于兔手术台上。

（2）沿颈正中线切开皮肤5～7cm，分离皮下组织，插好气管插管。分离出两侧迷走神经，穿线备用。

（3）分离颈部膈神经：分离一侧颈部的软组织，在颈外静脉和胸锁乳突肌之间用止血钳向纵深分离，可见在脊柱腹外侧颈椎发出的第3、4、5颈神经（臂丛）向后外方走行。在颈椎旁的肌肉上（臂丛内侧）可见一较细的膈神经。膈神经由第4、5颈神经的腹支汇合而成，在较粗的臂丛神经的内侧横过并与之交叉，向后内侧走行，从斜方肌的腹缘进入胸腔。用玻璃分针将膈神经分离2cm，穿线备用。将颈部一侧皮肤接地，以减少干扰。做好皮兜，注入38℃的液状石蜡，起保温、绝缘和防止神经干燥的作用。记录时将膈神经钩在悬空的引导电极上，避免触及周围组织，以减少干扰。

（4）若同时记录呼吸曲线，将气管插管与呼吸流速信号传感器相连。

2.仪器的连接与调试(https://www.daowen.com)

将搭放有膈神经的引导电极输入接口与BL-420I系统的通道1接口相连。呼吸流速信号传感器与通道2相连，启动BL-420I系统后，从“实验模块”主菜单中的“呼吸”子菜单项选择“膈神经放电”，开始膈神经放电与呼吸波的记录。

3.观察项目

（1）观察正常情况下膈神经放电的基本波形，以及膈神经放电和呼吸节律之间的关系。

（2）将CO2球胆与气管插管的一侧开口相连，让动物吸入CO2，观察CO2对膈神经放电和呼吸运动的影响。出现明显变化后，关闭CO2球胆的阀门，让家兔呼吸逐渐恢复正常。

（3）于家兔耳缘静脉注射尼可刹米注射液按每千克体重125mg尼可刹米，观察膈神经放电和呼吸运动之间的关系。

（4）切断一侧迷走神经干后，观察呼吸运动及膈神经放电有何变化，再切断另一侧迷走神经，观察呼吸运动及膈神经放电的变化。