附录4 染色液配方

附录4 染色液配方

一、醋酸洋红染色液

将45mL醋酸加入到55mL蒸馏水中,加入洋红1g,煮沸,使其充分饱和,冷却过滤,并加醋酸铁或氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴或在加入1g洋红的同时加入1枚大头针,煮沸,然后文火2~3h,冷却过滤。

二、Schiff试剂

将1g碱性品红加入200mL煮沸的蒸馏水中,再煮沸3~4min,待溶液全部冷却到50℃时过滤,再等溶液冷到25℃以下时,加入30mL 1MHCl和3g偏重亚硫酸钠,装进棕色瓶,塞上瓶塞,置于黑盒中48h,溶液呈无色或淡黄色即可。若有少许红色,可用活性炭(加1g)过滤。经过滤的溶液(或加入活性炭充分振荡)还是淡红色就不能用,需要重新配制。

三、2%乳酸醋酸地衣红

取45mL冰醋酸置于250mL的三角瓶中,瓶口加一棉塞,在乙醇灯下加热至微沸,缓慢加入2g地衣红使其溶解,待冷却后加入55mL蒸馏水,振荡5~10min,过滤到棕色试剂瓶中备用。或在三角瓶中加入100mL 45%的冰醋酸,在乙醇灯上加热至沸,慢慢溶入2g地衣红,继续回流煮沸1h后过滤备用。临用前,取等量的2%醋酸地衣红与70%乳酸液混合,过滤后使用。

四、吉姆萨染液

取0.5g吉姆萨(Giemsa)粉末,加33mL纯甘油,在研钵中研细,放在56℃恒温水浴中保温90min。再加入33mL甲醇,充分搅拌,用滤纸过滤,于棕色细口瓶保存,作为原液。用时以磷酸缓冲液稀释。