白色念珠菌检测
念珠菌属于真菌界半知菌亚门-芽孢菌纲-隐球酵母目-隐球酵母科，是双相型单细胞酵母菌。念珠菌属约有150种，其中白色念珠菌（candida albicans）是念珠菌属（假丝酵母属）最常见的种，也是临床上浅部及深部真菌病中发病率最高的病原菌。白色念珠菌广泛存在于自然界，可从水果、蔬菜、各类乳制品、土壤、木材、昆虫等分离出来。是人体正常菌群之一，主要生存于人体的口腔、上呼吸道、皮肤、黏膜、消化道、阴道等黏膜处。该菌为条件致病菌，在人体中，无症状时常表现为酵母细胞型，侵犯组织和出现症状时常表现菌丝型。和其他条件致病真菌一样，在正常情况下，常与机体处于共生状态，正常人群白色念珠菌的带菌率可高达40%；从阴道黏膜分离出来的念珠菌85%～90%为白色念珠菌。
念珠菌的致病性是相对的，在正常情况下，一般不致病。在机体某些生理、病理因素影响下，如抗生素、激素、免疫抑制药的频繁使用或滥用；长期口服避孕药、糖尿病或妊娠、器官移植、大型外科手术等诱因可引起念珠菌的感染。当男女生殖器内环境改变，如穿紧身化纤内裤、肥胖而使阴部湿度增加也易引起阴道深处的念珠菌异常增多，侵犯了阴道黏膜，破坏了阴道内的平衡环境，再当机体抵抗力或免疫力降低时，念珠菌就会大量繁殖发展为菌丝型，侵犯组织，达到一定量时，人体就会发病。由白色念珠菌引起的生殖器念珠菌病是一种常见的男女生殖器的疾病，当妇女阴道上皮细胞糖原增加，酸性增强时，白色念珠菌会繁殖引起阴道炎或男性龟头炎等。
白色念珠菌致病力强，发病率高与其本身的特点有关，白色念珠菌的致病力与念珠菌的黏附力、两型性形态、毒素、细胞表面成分、细胞外酶等有密切关系，白色念珠菌对机体组织上皮细胞具极强的吸附能力，当局部温度、湿度等环境条件有利于其繁殖时，即可穿过屏障进入体内引起疾病，此外，本菌侵袭机体时能形成假菌丝，菌丝的延长使机体吞噬细胞吞噬作用下降，增强了菌体的致病力。本菌还能产生多种酶类，引起组织损伤，如破坏表皮角蛋白屏障、降低细胞免疫反应等。
念珠菌性阴道炎的主要症状是外阴瘙痒，有灼热感，症状一般由轻度到不能耐受，此时，阴道黏膜发红、水肿，有白色凝乳状或片块状膜样物附着，易剥离，其下可有糜烂或浅溃疡，白带多，呈水样、脓样或豆腐渣状。念珠菌性阴道炎继发感染可引起念珠菌性外阴炎。由于分泌物对外阴的刺激，使大阴唇、小阴唇、阴阜、外阴周围、肛周及大腿内侧出现红斑、糜烂，表面有湿润性白色鳞屑，红斑周围可出现血丘疹、小水疱等，亦有明显的瘙痒感。阴道念珠菌病常见于青春期到绝经期前的妇女，未来月经的少女及绝经后的妇女阴道念珠菌发病率较低。在无症状的健康育龄妇女阴道中，念珠菌的检出率为20%左右。妊娠、服用避孕药、糖尿病等因素可使带菌率增高。
男性念珠菌性包皮龟头炎主要症状为阴茎发痒，可见包皮内有黏液样或脓样分泌物，阴茎龟头和冠状沟红肿，阴茎头表面有糜烂面、斑丘疹，甚至有壁薄的脓疱，严重者，可波及阴茎体、阴囊、大腿内侧及腹股沟等处。如累及舟状窝则可有尿频、尿痛等症状，男性念珠菌性包皮龟头炎多由于配偶患有念珠菌性阴道炎而被感染或由于不洁性交传染而来。其检出率与包皮是否过长也有密切的关系。白色念珠菌除了可以通过公共浴池、浴盆、浴巾、游泳衣、衣服、医疗器械和敷料等传播，还可通过性生活传播，故世界卫生组织将其列入性传播疾病之中。
念珠菌对热的抵抗力不强，加热至60℃1h后即可死亡。但对干燥、日光、紫外线及化学制剂等抵抗力较强。生殖器念珠菌感染治疗常用的药物有制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑等。女性生殖器念珠菌病常由于糖原分解，阴道在酸性的环境中，白色念珠菌繁殖加快。所以，用改变阴道酸碱度的方法对于治疗本病是有帮助的。常用的方法是，用2%～4%的苏打水冲洗阴道及外阴，轻轻拭干后，置制霉菌素栓于阴道内，这样治疗往往能取得好的疗效。男性龟头包皮念珠菌病通常只需外涂药物即可。
诊断生殖器白色念珠菌病除典型的症状、体征外，实验室检查是必不可少的。对生殖器分泌物的培养方法复杂，检测费时，此外，除了对无菌部位标本的培养外，对分泌物的培养不能区别寄居和临床显性感染；虽然此法检测敏感性较高，但阳性结果的临床意义须具体分析，不适合于生殖器念珠菌的快速诊断。分泌物的直接涂片镜检是非常简单的实验室检测方法，可以明确诊断，但此法诊断的准确率较低（敏感度约56%）。染色镜检可用革兰染色法，刚果红染色或PAS染色，其阳性检出率比直接镜检法稍高。念珠菌显色培养基虽能快速、简便、准确地分离鉴定临床常见念珠菌，提高对混合念珠菌感染的识别，但仍需要一定的培养时间。
近年来，用于检测真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查已用于深部真菌感染的实验室检测，并已成为这一领域研究的热点。胶乳凝集玻片试验、金标法均是典型的POCT检测方法，可检出白色念珠菌特异性分泌蛋白抗体，方法简单，快速出结果，有较高的特异性和敏感性，适合一般的医院、社区诊所及基层医院使用。
【检测原理】 阴道白色念珠菌快速测定（乳胶凝集法）。采用抗白色念珠菌蛋白抗体，对疑有阴道白色念珠菌感染患者的标本，经专用缓冲液处理，除去大量的上皮细胞等以避免干扰检测，然后进行直接定性凝集反应，对可疑的纯化分离培养物也可以进行直接鉴定。多用途的无菌棉拭子（专利产品）加上纯化与吸收后的高亲和力抗白色念珠菌球蛋白，在5～10min内做出快速诊断和鉴定。
【适应证】 念珠菌性阴道炎、念珠菌性龟头包皮炎。
【标本采集】 用阴道拭子采集感染部位分泌物，立即送检。
【参考范围】 阴性。
【操作方法】(https://www.daowen.com)
1．用多用途的无菌棉拭子，采取阴道分泌物，将棉拭子插入软试管，滴加缓冲液至0．5ml刻度（当分泌物多时加至1．0ml刻度）。
2．搅动拭子10s充分混合标本，静置5min。
3．挤压管壁和拭子，将已处理的标本滴加在凝集试验反应卡片上的圈环内2滴（约50μl），再向其上滴加2滴抗白色念珠菌球蛋白，静置2min。
4．摇晃卡片，10min后观察有紫色的凝集颗粒产生。
5．纯分离的待检物，用无菌棉拭子蘸取单个菌落直接在滴加了2滴抗白色念珠菌球蛋白的卡片上混匀即可。
6．对照试验。阴性对照用葡萄球菌菌悬液，阳性对照用白色念珠菌菌悬液。
7．质量控制。每个试剂盒首次使用时先做阳性和阴性对照，此后每周测定1次。测定前将阳性和阴性对照混匀，操作方法同上。
【结果判读】
1．对照结果 阳性对照有凝集，阴性对照无凝集表示试剂可用。
2．阴性结果 应无凝集，表示样本中无白色念珠菌。
3．阳性结果 应有凝集，表示样本中有白色念珠菌。
【临床意义】 念珠菌性阴道炎的诊断应根据检测结果、感染部位、症状持续的时间、分泌物的性状、是否有痒感、有无易感因素及曾经是否感染过等情况综合判断。阳性可诊断为念珠菌性阴道炎或龟头包皮炎，但阴性结果不能排除白色念珠菌感染的可能。
【方法学优点】 白色念珠菌快速测定（乳胶凝集法）敏感度约为78%，特异性为95%。