沙眼衣原体抗原测定

四、沙眼衣原体抗原测定

衣原体(chalmydiae)是一类在真核细胞内专营寄生生活的微生物,在光学显微镜下分为两种,较小的称原体(elementary body),直径约为0.3μm,卵圆型,电子密度大,具有感染性。较大的称为始体(initial body),直径为0.3~0.5μm,呈圆形或不规则形,电子密度较小,没有感染性。但有人认为还存在着一种过渡形态,即中间体(intermediate body),也有人把始体称为网状体(reticulate body)。衣原体广泛寄生于人、哺乳动物及禽类,仅少数致病。根据抗原构造、包涵体的性质、对磺胺敏感性等的不同,将衣原体属分为沙眼衣原体(C.trachomatis)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)、肺炎衣原体(C.pneumonia)三个种。其中沙眼衣原体又有三个生物变种,即沙眼生物变种、性病淋巴肉芽肿(LGV)生物变种和鼠生物变种。沙眼生物变种还有A~K14个血清型(包括Ba、Da、Ia)。LGV生物变种还有4个血清型,即L1、L2、L2a和L3。

(一)生活周期

衣原体有其独特的生活周期,种间无差异。原体在宿主细胞外较为稳定,但具有高度的感染性。当与易感细胞接触时,以吞饮的方式进入细胞内,由宿主细胞膜包围原体而形成空泡,在空泡内的原体增大,发育成为始体。始体在空泡以二分裂形式繁殖,在空泡内形成众多的子代原体,构成各种形态的包涵体(inclusion body)。成熟的子代原体从宿主细胞释放出来,再感染其他的宿主细胞,开始新的发育周期。每个发育周期约需40h。始体是衣原体周期中的繁殖型,而不具有感染性。

沙眼衣原体主要通过性传播及垂直传播将病原体传染给伴侣和婴儿。

(二)临床表现

1.对于女性患者,最常见的是引起化脓性宫颈炎,部位大多为宫颈内的柱状上皮细胞。宫颈可能会表现出狭窄和肿胀,也可能会出现接触性出血及月经间期出血,出现脓性白带增多,可伴有外阴瘙痒。

2.沙眼衣原体引起的女性尿道炎无尿痛症状,或尿痛很轻微,可有少量的尿道分泌物。如果巴氏腺被感染,还能引起巴氏腺炎。一般而言,女性患者多数症状很轻,或者没有自觉症状,兼之感染后还有数天到数月的潜伏期,因此常被忽略,容易造成本病的传播。

3.容易引起盆腔炎,盆腔炎最主要的病原体是沙眼衣原体。

4.对于男性患者,沙眼衣原体感染主要表现为尿道炎,大多患者有尿道分泌物和排尿疼痛表现,有25%的患者没有明显症状。尿道感染也会发展为急性附睾炎。

5.对于婴儿,沙眼衣原体可以经产道通过母亲传染给孩子,导致新生儿颗粒性结膜炎和肺炎。

(三)检测方法

【检测原理】 采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术,定性检测女性宫颈拭子、男性尿道拭子和男性尿液中是否含有沙眼衣原体抗原。

【适用范围】 适用于沙眼衣原体感染的快速诊断。

【标本采集】 用一次性灭菌棉签,刮取女性宫颈口及男性尿道口,取得标本后,立即送检。用无菌试管接取男性中段尿,即刻送检。

【操作方法】

1.子宫颈及尿道标本

(1)向裂解管中垂直滴入裂解液A,立即放入棉签,挤压裂解管并转动棉签,静置2min。

(2)垂直滴入裂解液B,挤压裂解管并转动棉签至溶液变色,静置1min。

(3)挤压并弃去棉签,加上滴头。(https://www.daowen.com)

(4)滴加裂解后溶液至加样孔,10min后读取结果。

2.尿液标本

(1)垂直滴加裂解液B于离心管中,震荡混匀标本。

(2)将混合溶液转移至裂解管中,向裂解管中垂直滴入裂解液A。

(3)挤压裂解管并转动棉签至溶液变色,静置1min。

(4)滴加裂解后溶液至加样孔,10min后读取结果。

【结果判读】

1.阳性 测试区与质控区均出现一条红色条带。

2.阴性 仅质控区出现一条红色条带,测试区内无红色条带出现。

3.无效 质控区未出现红色条带。

【参考范围】 阴性。

【临床意义】

1.有盆腔炎史的妇女发生不孕的危险比正常人高7倍,70%以上的宫外孕与衣原体感染有关。

2.孕期感染沙眼衣原体会增加死产、新生儿死亡、早产和新生儿低体重的风险。

3.60%的附睾炎是由沙眼衣原体引起的,这将降低生育能力。感染还可能扩散到直肠,引起直肠炎。

【方法学优点】

1.此方法特异性与敏感性比较高与核酸扩增法相比,符合度非常高。

2.标本无需特殊处理,15min能够得出结果。

(王树琴 刘 静 王新华 赵 媛 王 芳)