三、检测方法
(一)胶体金法
【检测原理】 采用胶体金单克隆抗原、抗体免疫竞争作用原理。当标本中含有毒品或其代谢产物的含量达到产品要求的最低检出量时,即与固着在渗透膜上的带显色微小颗粒的有限抗体结合,从而阻止其与测试区(T线区)的抗原相结合,T线区便不会出现沉淀色带。若标本中不含有毒品或其代谢物,T线区便会出现一条色带沉淀线。试纸上另一条色带(C线区)用于确定试验是否可靠。
【适应证】
1.戒毒所、医院、征兵、入学体检、药物滥用高危人群普查及筛查。
2.禁毒机构、公安部门对可疑吸毒人群的筛查,戒毒机构对吸毒人员治疗、监控。
3.医疗卫生防疫部门的普查、筛查、体检等。
4.基层民警办案时对可疑人员及可疑物直接进行判定。
【标本采集】
1.人体尿液 使用洁净、无渗漏、带盖容器收集随机尿,24h内进行检测,由于THC-COOH易于水解和具吸附性,其浓度变化很快。因此,一定要低温存放,以减缓THC-COOH的降解。标本收集后如不能立即检测,需2~8℃冷藏;保存3d以上者,应冷冻贮藏,检测时需恢复至室温后方可检测。
2.可疑药物 收集液体样本可直接检测,固体标本需溶解后进行检测。
【操作方法】
1.撕开铝箔袋,从袋中取出检测试纸,并检查试纸是否完好无损。
2.将试纸条带有MAX线一端插入标本杯内的液体中,液面不能超过MAX线。
3.1~5min判读结果,5min后显示结果无效。
【结果判读】
1.阴性 在反应区出现控制线(C)和反应线(T)两条红色条带。
2.阳性 在反应区只出现控制线(C)一条色带,但无反应线(T)色带出现。
3.无效 在反应区控制线(C)和反应线(T)均无色带出现,或只出现反应线(T)一条色带,说明试验无效,应用新的试纸条重新测试。
【参考范围】 大麻:<50ng/ml。
【临床意义】
1.大麻检测试纸是检测被检测物中是否含有THC及其代谢产物,检测结果超过参考范围时可确定被检者吸服了大麻或被检物中含有大麻类物质。
2.当吸毒者尿样中被检毒品浓度低于检测阈值时,检测结果会出现阴性,此时,可根据用药途径、用药量及用药时间查找原因,必要时可参考尿检可持续阳性时间,并在毒品可持续阳性时间之内进行复检。大麻阳性持续时间为56h。
【方法学优缺点】
1.一步法定性检测人尿液中的毒品代谢物,能快速甄别是否吸服大麻、吗啡、冰毒、摇头丸、海洛因等毒品。
2.操作简单快捷,1~5min可确认结果。无需专业操作培训。
3.特异性强,影响因素极小,选用高特异性的单克隆抗体,将可能发生的交叉反应降到最低限度,阴性结果可靠。
4.虽为定性试验,但灵敏度较高。
5.内设质控,确保结果准确可靠。
6.参照国际药物滥用监测标准,设计了符合国内情况的检测阈值。
7.金标法试纸检测毒品为过筛定性试验,阴性结果可靠,阳性结果必要时可经确证试验确证后更有判断意义。
【注意事项】(https://www.daowen.com)
1.服用复方甘草合剂、联邦止咳露等含可待因的药品后,会出现假阳性结果。服用可乐、常用感冒药、消炎药对检测结果均无任何影响。
2.检测结果应在规定时间之内进行判读,5min之后出现T线结果无效。
3.不要使用尿蛋白呈强阳性的尿样进行检测,因为严重的尿蛋白或血尿可能对测试条的结果产生负面影响。
4.包装袋打开后应立即使用,以免试纸吸收空气中的水分后影响检测结果。
(二)化学检验法
快蓝B盐法
【检测试剂】 ①快蓝B盐试剂(快蓝B盐试剂);②0.1mol/L NaOH水液(相当于0.4%NaOH水液);③氯仿。
【操作方法】 取10ml试管,加入少量可疑样品,加快蓝B盐试剂1~2勺,加氯仿1~2ml,振摇5~10min(树脂及油样品振摇1~2min即可),加入0.1mol/L NaOH水液1~2ml,振摇2~3min,静置。
【结果判读】 试管中底部氯仿层如显红色,表示可能含有大麻成分。大麻植物显淡红色,其他都显红色,原因是大麻植物中浓度较低的缘故。是否有大麻成分存在主要看氯仿层颜色,不考虑水层。
快蓝B盐法的纸上试验
【检测试剂】
①快蓝B盐-无水Na2SO4固体试剂:0.5g快蓝B盐与50g的无水硫酸钠仔细混匀。
②石油醚(60~90℃)。
③10%的NaHCO3水溶液。
【操作方法】
(1)取一张小滤纸,叠成漏斗状(过滤时的叠法),放入少量可疑物于其中。
(2)加2~3滴石油醚于可疑物上,使溶剂浸透滤纸底部,挥干底部溶剂。
(3)加快蓝B盐-无水硫酸钠固体试剂于该滤纸底部,滴加2~3滴NaHCO3水液,浸到滤纸上,观察变化。
【结果判读】 滤纸上有红色出现为阳性,说明可能有大麻成分。
香草醛-乙醛试剂法
【检测试剂】 ①0.4g香草醛(香夹兰素)加到20ml 95%乙醇中,使之溶解,再加0.5ml乙醛;②浓盐酸;③氯仿。
【操作方法】
(1)取10ml试管,加少量可疑样品于试管中(取样品法同前),加入约2ml香草醛-乙醛试剂,振摇1~2min。
(2)加2ml浓盐酸摇匀(数秒钟)放置2~3min。
(3)加氯仿2ml,缓慢摇动试管,静置分层后观察。
【结果判读】 如含有大麻成分,氯仿层显紫色,上层为蓝色。
【注意事项】
(1)本反应灵敏度很高,如取检材量较多,特别大麻油和树脂,氯仿层变成黑紫色,很难观察,故而检材取量要求尽量少些。
(2)本反应加①、②试剂后变成蓝色,加氯仿后氯仿层变成紫色,试剂层仍为蓝色。
(3)市售乙醛试剂多为40%溶液,往往分层,所以加乙醛时要取上层液,不可取下层液,因为下层为水液。
(4)香草醛试剂不宜多配,最好是临用新配。