三、检测方法

三、检测方法

(一)胶体金法

(1)安非他明检测试纸。

(2)甲基安非他明(冰毒)检测试纸。

(3)MDMA(摇头丸)检测试纸。

【检测原理】 采用胶体金单克隆抗原、抗体免疫竞争作用原理。当标本中含有毒品或其代谢产物的含量达到产品要求的最低检出量时,即与固着在渗透膜上的带显色微小颗粒的有限抗体结合,从而阻止其与测试区(T线区)的抗原相结合,T线区便不会出现沉淀色带。若标本中不含有毒品或其代谢物,T线区便会出现一条色带沉淀线。试纸上另一条色带(C线区)用于确定试验是否可靠。

【适应证】

1.戒毒所、医院、征兵、入学体检、药物滥用高危人群普查及筛查。

2.基层禁毒机构公安部门、禁毒机构对可疑吸毒人群的筛查,戒毒机构对吸毒人员治疗监控。

3.医疗卫生防疫部门的普查、筛查、体检等。

4.基层民警办案时对可疑人员及可疑物直接进行判定。

【标本采集】

1.人体尿液 收集随机尿,24h内进行检测,如不能立即检测应在-20℃下保存,检测前自然解冻至室温。

2.可疑药物 收集液体样本可直接检测,固体标本需溶解后进行检测。

【操作方法】

1.撕开铝箔袋,从袋中取出检测试纸,并检查试纸是否完好无损。

2.将试纸条带有MAX线一端插入标本杯内的液体中,液面不能超过MAX线。

3.1~5min判读结果,5min后显示结果无效。

【结果判读】

1.阴性 在反应区出现控制线(C)和反应线(T)一条红色条带。

2.阳性 在反应区只出现控制线(C)一条色带,但无反应线(T)色带出现。

3.无效 在反应区控制线(C)和反应线(T)均无色带出现,或只出现反应线(T)一条色带,说明试验无效,应用新的试纸条重新测试。

【参考范围】 安非他明:<1 000ng/ml;甲基安非他明:<1 000ng/ml;MDMA(摇头丸):<500ng/ml。

【临床意义】

1.检测结果超过参考范围时可确定被检者吸食了甲基苯丙胺类兴奋剂或被检物中含有甲基苯丙胺类兴奋剂。

2.但当吸毒者尿样中被检毒品浓度低于检测阈值时,检测结果会出现阴性,此时,可根据用药途径、用药量及用药时间查找原因,必要时应在毒品可持续阳性时间之内进行复检。阳性持续时间:安非他明为2h至2d;甲基安非他明为2h至3d;MDMA(摇头丸)为1~5h。但应注意被检标本的酸碱度(pH)会影响甲基苯丙胺的排出。

3.甲基苯丙胺的体内代谢是比较稳定的,服用甲基苯丙胺后,有35%~45%摄取量的甲基苯丙胺以原形从尿中排出,尿的酸碱度对甲基苯丙胺的排出有明显的影响,酸性尿排出快,碱性尿排出慢。因为尿为碱性时,氨基不发生离子分解而呈脂溶性,从尿排出的甲基苯丙胺也容易被肾近曲小管再吸收,所以在碱性尿环境下,甲基苯丙胺在体内代谢产生的氨基在血中含量明显升高,甲基苯丙胺和苯丙胺在体内的蓄积时间明显增长,发挥的药效作用也就加长。

4.摄取治疗剂量甲基苯丙胺时,尿液中甲基苯丙胺原体和代谢物苯丙胺的浓度比为0.10~0.15。摄取超剂量的甲基苯丙胺时浓度为0.10。故尿液中检测发现甲基苯丙胺和苯丙胺浓度之比大于0.15时,提示被检测者摄取的毒品含有甲基苯丙胺和苯丙胺。如果尿液中含有高浓度的甲基苯丙胺而无苯丙胺存在,也应考虑是否为麻黄碱造成的伪阳性。

5.甲基苯丙胺的脱甲基作用是相当有意义的,仅有少量的L型甲基苯丙胺可以脱甲基转化为苯丙胺,而其他的相关物、苯丙胺、麻黄碱均根本不能。因此在含甲基苯丙胺的生物检材中如果检出苯丙胺,就可认定被检者服用了法律的精神兴奋剂——甲基苯丙胺。

【方法学优缺点】

1.一步法定性检测人尿液中的毒品代谢物,能快速甄别是否吸服吗啡、冰毒、摇头丸、大麻、海洛因等毒品。

2.操作简单快捷,1~5min可确认结果。无需专业操作培训。

3.特异性强,影响因素极小,选用高特异性的单克隆抗体,将可能发生的交叉反应降到最低限度,阴性结果可靠。

4.虽为定性试验,灵敏度较高。

5.内设质控,确保结果准确可靠。

6.参照国际药物滥用监测标准,设计了符合国内情况的检测阈值。

7.金标法试纸检测毒品为过筛定性试验,阴性结果可靠,阳性结果必要时可经确证试验确证后更有判断意义。

【注意事项】(https://www.daowen.com)

1.服用复方甘草合剂、联邦止咳露等含可待因的药品后,会出现假阳性结果。服用可乐、常用感冒药、消炎药对检测结果均无任何影响。

2.检测结果应在规定时间之内进行判读,5min之后出现T线结果无效。

3.不要使用尿蛋白呈强阳性的尿样进行检测,因为严重的尿蛋白或血尿可能对测试条的结果产生负面影响。

4.标本收集后如不立即检测,需2~8℃冷藏,保存3d以上者,应冷冻贮藏,检测时需恢复至室温后方可检测。

5.包装袋打开后应立即使用,以免试纸吸收空气中的水分后影响检测结果。

(二)化学检测法

甲醛-浓硫酸反应(marquis test)

【检测试剂】 2~3滴40%甲醛加到3ml浓H2SO4,轻轻混匀。

【操作方法】 取少量样品1~2mg粉状物或1~2滴液体样品,放在反应板上,沿孔壁加试剂1~2滴,观察颜色。

【结果判读】 苯丙胺、甲基苯丙胺为橘红色,MDA、MDMA为蓝紫色。

【注意事项】 本反应检测限一般为1μg。

乙醛-硝普钠反应(simon’s test)

【检测试剂】 ①20%Na2CO3水溶液;②1%硝普钠水溶液;③50%的乙醛乙醇溶液。

【操作方法】 取少量样品放在小试管中,依次加入试剂①、②、③各1~2滴,振摇小试管。

【结果判读】 若有甲基苯丙胺或MDMA等其他仲胺,则出现深蓝色,而一些伯胺如苯丙胺、MDA、DOM等则缓慢出现粉红至樱红色。

【注意事项】 灵敏度较低。这个实验可用来区别伯胺和仲胺。但有些添加的杂质也产生假阳性。乙醛试剂配制时注意取上层液,不可取下层水液,否则不起反应。硝普钠试剂要新配,浓度要求不严格。

浓H2SO4反应

【检测试剂】 浓硫酸

【操作方法】 取少量样品于反应板上,沿孔壁加2滴浓H2SO4,观察。

【结果判读】 苯丙胺、甲基苯丙胺不出现颜色,其他一些苯丙胺类衍生物出现不同颜色,如MDMA紫色。

【注意事项】 本试验仅作筛选试验。

没食子酸(gallic acid)试剂

【检测试剂】 0.1g没食子酸溶在20ml浓H2SO4中(此试剂临用时新配)。

【操作方法】 取少量样品(0.1~1mg)放在反应板的孔中,加1~2滴试剂,观察。

【结果判读】 如MDA、MDMA和MMDA的存在,会出现亮绿到暗绿色的颜色。苯丙胺、甲基苯丙胺阴性。

【注意事项】 本试验对亚甲二氧基环状取代物的检测灵敏度很高,取检材用量要少,否则呈绿色发黑不易观察,滴试剂后3~5min后显色。

丙酮-硝普钠试验

【检测试剂】 ①0.5g的硝普钠溶解5%丙酮水液50ml;②1g碳酸钠溶解在50ml水中。

【操作方法】 检材少许于白色凹面板上,加硝普钠试剂1~2滴,碳酸钠试剂1~2滴。

【结果判读】 苯丙胺:淡紫色;甲基丙胺、盐酸麻黄碱、氧麻黄碱均无色。

【注意事项】 本反应灵敏度较低,检材应多取。

酸性碘铂酸钾试剂法

【检测试剂】

①10%的六氯铂酸水溶液3ml,加4%碘化钾水溶液100ml,水200ml混匀。②1mol/L盐酸溶液。临用时取①液1份,加②液2份摇匀即可。

【操作方法】 检材少许于白色凹面板上,加试剂1~2滴。

【结果判读】 甲基苯丙胺显出明显灰蓝色,检出限纯品20μg左右,苯丙胺不显色,本法是筛选甲基苯丙胺较好的方法。