三、检测方法
(一)胶体金法
【检测原理】 采用胶体金单克隆抗原、抗体免疫竞争作用原理。当标本中含有毒品或其代谢产物的含量达到产品要求的最低检出量时,即与固着在渗透膜上的带显色微小颗粒的有限抗体结合,从而阻止其与测试区(T线区)的抗原相结合,T线区便不会出现沉淀色带。若标本中不含有毒品或其代谢物,T线区便会出现一条色带沉淀线。试纸上另一条色带(C线区)用于确定试验是否可靠。
【适应证】
1.戒毒所、医院、征兵、入学体检、药物滥用高危人群普查及筛查。
2.禁毒机构、公安部门、对可疑吸毒人群的筛查,戒毒机构对吸毒人员治疗、监控。
3.医疗卫生防疫部门的普查、筛查、体检等。
4.基层民警办案时对可疑人员及可疑物直接进行判定。
【标本采集】
1.人体尿液 使用洁净、无渗漏、带盖容器收集随机尿,24h内进行检测,标本收集后如不能立即检测,需2~8℃冷藏,保存3d以上者,应冷冻贮藏,检测时需恢复至室温后方可检测。
2.可疑药物 收集液体样本可直接检测,固体标本需溶解后进行检测。
【操作方法】
1.撕开铝箔袋,从袋中取出检测试纸,并检查试纸是否完好无损。
2.将试纸条带有MAX线一端插入标本杯内的液体中,液面不能超过MAX线。
3.1~5min判读结果,5min后显示结果无效。
【结果判读】
1.阴性 在反应区出现控制线(C)和反应线(T)一条红色条带。
2.阳性 在反应区只出现控制线(C)一条色带,但无反应线(T)色带出现。
3.无效 在反应区控制线(C)和反应线(T)均无色带出现,或只出现反应线(T)一条色带,说明试验无效,应用新的试纸条重新测试。
【参考范围】 可卡因:<300ng/ml。
【临床意义】
1.可卡因检测试纸是检测被检测物中是否含有可卡因及其代谢产物苯甲酰爱冈宁、爱冈宁甲酯,检测结果超过参考范围时可确定被检者服用了可卡因或被检物中含有可卡因及其代谢产物。
2.当滥用可卡因者尿样中被检毒品浓度低于检测阈值时,检测结果会出现阴性,此时,可根据用药途径、用药量及用药时间查找原因,必要时可参考尿检可持续阳性时间,并在毒品可持续阳性时间之内进行复检。可卡因阳性持续时间为24h。
【方法学优缺点】
1.阳性持续时间一步法定性检测人尿液中的毒品代谢物,能快速甄别是否服用可卡因、吗啡、冰毒、摇头丸、大麻、海洛因、等毒品。
2.操作简单快捷,1~5min可确认结果,无需专业操作培训。
3.特异性强,影响因素极小,选用高特异性的单克隆抗体,将可能发生的交叉反应降到最低限度,阴性结果可靠。
4.该检测法虽为定性试验,但灵敏度较高。
5.内设质控,确保结果准确可靠。
6.参照国际药物滥用监测标准,设计了符合国内情况的检测阈值。
7.金标法试纸检测毒品为过筛定性试验,阴性结果可靠,阳性结果必要时可经确证试验确证后更有判断意义。(https://www.daowen.com)
【注意事项】
1.服用复方甘草合剂、联邦止咳露等含可待因的药品后,会出现假阳性结果。服用可乐、常用感冒药、消炎药对检测结果均无任何影响。
2.检测结果应在规定时间之内进行判读,5min之后出现T线结果无效。
3.不要使用尿蛋白呈强阳性的尿样进行检测,因为严重的尿蛋白或血尿可能对测试条的结果产生负面影响。
4.包装袋打开后应立即使用,以免试纸吸收空气中的水分后影响检测结果。
(二)化学检验法
硫氰酸钴反应(cobalt thiocyanate test)
【检测试剂】 ①6mol/L盐酸;②2.5%硫氰酸钴水液:0.5g硫氰酸钴溶于20ml水中。
【操作方法】 检材少许于试管中或白色凹面板孔中,加2~3滴试剂①,振摇10min,再加1~2滴试剂②。
【结果判读】 出现鲜蓝色沉淀或颗粒为可卡因、可卡因碱、苯甲酰爱康宁阳性,甲基爱康宁不显色。
【注意事项】 甲喹酮、海洛因、苯环己哌啶(PCP),地布卡因等有相似的蓝色反应。
改良的硫氰酸钴反应(scott test)
【检测试剂】 ①2.5%硫氰酸钴水液5ml与96%的丙三醇5ml等体积混匀即可。②6mol/L盐酸。③氯仿。
【操作方法】
(1)取检材少许于试管中,加上面试剂①1~2滴,振摇10s观察结果。
(2)经操作(1)后若出现蓝色,在出现的蓝色液中,加1~2滴6mol/L盐酸,振摇。
(3)经操作(2)后若出现粉红色,将粉红色溶液中加5~10滴氯仿,振摇数秒钟。
【结果判读】
(1)经操作(1)后出现蓝色,说明可能含可卡因(苯环己哌啶、地布卡因、甲喹酮亦产生类似蓝色反应)。如不出现蓝色,可排除可卡因。
(2)经操作(2)后,蓝色褪去,溶液为粉红色(试剂色),说明可卡因存在;如果蓝色不褪色,说明不含可卡因。
(3)如氯仿层出现蓝色,进一步证明可卡因存在。
【注意事项】 本反应可逐步确证可卡因的存在;可以检验1%浓度可卡因可疑物;它可以区别可卡因的相关物:爱康宁、甲基爱康宁、苯甲酰爱康宁。因为这三种相关物不呈蓝色反应;且关键步骤是6mol/L盐酸的用量要严格控制,否则影响反应效果,建议先用标准样品试验掌握操作技巧之后,再进行检材试验。
对二甲氨基苯甲醛试剂反应
【检测试剂】 ①1%的对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸溶液。②饱和的苦味酸水液。
【操作方法】 检材少许于白色凹板孔中,加试剂①1~2滴,振摇数秒钟。
【结果判读】 呈红棕色,为可卡因阳性;再加饱和的苦味酸水液,则呈黄色,为可卡因阳性。
甲醛-浓硫酸试剂反应
【检测试剂】 ①8~10滴甲醛加在10ml冰醋酸中。②浓H2SO4。
【操作方法】 取检材少许于白色凹板孔中,沿孔壁加1滴试剂①,加3滴试剂②。
【结果判读】 呈黄红色为可卡因阳性。紫色出现可能有鸦片、吗啡、海洛因、可待因成分。