物理消毒灭菌法
（一）热力消毒灭菌法（heat disinfection sterilization）
是利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡。包括干热法和湿热法。
1.干热法 是指相对湿度在20%以下的高热消毒。干热消毒灭菌是由空气导热，传热较慢。因此，干热消毒灭菌所需温度高，作用时间长。包括燃烧法、干烤法。
（1）燃烧法：用火直接点燃或在焚烧炉内焚烧，是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。适用于动物和患者尸体、解剖组织、废弃的棉织品、纸张、垃圾、污染的敷料等；某些金属器械和陶瓷类物品，急用时也可用燃烧法灭菌，但锐利刀剪禁用此法，以免锋刃变钝。金属器械可在火焰上燃烧约20s；陶瓷类容器，可倒入少量的95%乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭1～2min，注意不可中途添加乙醇以免引起火灾。
（2）干烤法：是在烤箱内进行灭菌。功率一般在3.2～4kW，最高温度一般为250℃，灭菌效果可靠。灭菌条件为160℃持续2h，或者170℃持续1h；或者180℃持续30min。其热力传导主要靠空气对流与介质传导。适用于在高温下不被破坏、不变质、不蒸发的物品的灭菌，如金属、玻璃、陶瓷制品、粉剂、油剂类等。不适用于塑料制品、纤维织物等的灭菌。
注意事项：①干烤灭菌前，物品必须刷洗干净，玻璃器皿保持干燥；②物品包装体积不大于10cm×10cm×20cm，高度不超过烤箱高度的2/3，勿与烤箱四壁接触；③有机物灭菌时，温度不超过170℃。
2.湿热法 湿热消毒灭菌法是通过水和水蒸气对物体进行加热。由于水和水蒸气传导热能的效率比空气大，传热快，穿透力强，因此湿热灭菌所需时间缩短，温度也减低。包括煮沸消毒法、流通蒸汽消毒法、低温蒸汽消毒法、压力蒸汽灭菌法。
（1）煮沸消毒法：是应用最早的消毒方法之一，也是家庭饮食业和一些基层医疗卫生单位常用的消毒方法，方法简单、方便、实用。适用于耐湿、耐高温的物品，如金属、陶瓷、玻璃和橡胶类等。
方法：将物品刷洗干净，全部浸没在水中，加热煮沸，从水沸开始计时，5～15min即可达到消毒目的。但某些细菌芽胞的抗热性比较强，须煮沸更长的时间，如破伤风杆菌芽胞需煮沸60min方可杀灭，而肉毒杆菌芽胞则须煮沸3h才能将其杀灭。将碳酸氢钠加入水中配成1%～2%浓度的溶液，可提高沸点至105℃，既可促进芽胞的杀灭，还可防止金属器械的生锈。
注意事项：①煮沸消毒前，物品必须刷洗干净，空腔导管内预先灌水。②根据物品的性质决定物品放入水中的时间：玻璃器皿在冷水时放入，橡胶物品于水沸后放入。③如煮沸途中加入物品，须待水沸后重新计时。④被煮沸消毒物品应全部浸入水中。煮沸过程中，物体如露出水面，须加足水分，待水沸后重新计时。⑤器械的轴节及容器的盖要打开，碗、盘等不透水物品应垂直放置，以利水的对流。⑥进行棉织品的消毒时，应适当搅拌。⑦高原地区气压低、沸点低，应适当延长消毒时间，海拔每增高300m，延长消毒时间2min。
（2）流通蒸汽消毒法：即常压消毒法，是在常压下，以100℃左右水蒸气进行消毒的方法。从产生水蒸气开始计时，15～30min即可达到消毒效果。常用于食具、便器的消毒。
（3）低温蒸汽消毒法：将蒸汽输入预先抽空的压力蒸汽灭菌器内，控制温度于73～80℃，持续10～15min。用于不耐高热的器材，如内镜、塑料制品等消毒，可杀灭大多数致病微生物。
（4）压力蒸汽灭菌法：是热力消毒灭菌中效果最为可靠、临床使用最广的一种方法。常用于耐高温、耐高压、耐潮湿物品的灭菌，如各类器械、敷料、陶瓷、橡胶、玻璃制品及溶液等。
根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器。下排式压力蒸汽灭菌器利用重力作用，使蒸汽在灭菌器中从上而下，将冷空气由下排气孔排出，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。由于空气排除不彻底，温度不宜超过126℃，所需灭菌时间较长。其工作参数为：温度121～126℃，压力102.97～137.30kPa，时间15～30min。预真空压力蒸汽灭菌器，利用机械抽真空的方法，使灭菌柜内形成负压，蒸汽得以迅速穿透物品的内部进行灭菌。由于空气排除彻底，热力穿透迅速，可在较高温度进行灭菌，所需灭菌时间短。其工作参数为：温度132℃，压力205.8kPa，时间5～10min。
注意事项：①须排尽灭菌器和物品包内的冷空气，如冷空气未被排出，锅内的实际温度会低于预定的温度，与压力表不相平行，包内冷空气的存在还会影响蒸汽向物品内部穿透，因而导致灭菌失败；②器械或物品灭菌前须洗净并晾干或擦干；③灭菌包的体积不宜过大，下排式压力蒸汽灭菌器的物品包不大于30cm×30cm×25cm，预真空压力蒸汽灭菌器的物品包不超过30cm×30cm×50cm，不宜过紧，各包间要有间隙，使蒸汽能对流且易穿透到包中央；盛放消毒物品的容器应有小孔，消毒前打开通气孔，以利于蒸汽流通，消毒完毕，关闭通气孔；④消毒物品不可放置过多，一般要放体积应低于灭菌容器的85%；消毒物品也不可过少，物品过少使灭菌器的气压下降较快，物品包内冷空气尚未被排出，影响消毒效果；⑤布类物品应放在金属、陶瓷类物品之上，以防包布受潮，阻碍蒸汽进入包中央，影响消毒效果；⑥被灭菌物品待干燥后才能取出；⑦随时观察压力及温度情况；⑧定期监测灭菌效果。
压力蒸汽灭菌效果监测：①物理监测法：将甩至50℃以下的150℃或200℃的留点温度计放入待灭菌包裹内，灭菌后检查其读数是否达到灭菌温度；②化学监测法：利用化学指示卡或化学指示胶带在121℃、20min或130℃、4min灭菌后观察颜色或性状的改变来判断灭菌效果；③生物监测法：是最可靠的监测法，利用对热耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽胞作为指示剂，灭菌后取出培养，全部菌片均无细菌生长表示灭菌合格。(https://www.daowen.com)
（二）光照消毒法
又称辐射消毒，主要利用紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白光解、变性而导致细菌死亡。包括日光曝晒法、紫外线灯管消毒法、臭氧灭菌灯消毒法。
1.日光曝晒法 由于日光具有热、干燥和紫外线的作用，有一定的杀菌力，通常用于床垫、毛毯、衣服、书籍等物品的消毒。将物品放在直射阳光下暴晒6h，并定时翻动，使物品各面接受日光照射，达到消毒目的。
2.紫外线灯管消毒法 紫外线属于电磁波，根据波长可分为A波、B波、C波和真空紫外线。消毒使用的紫外线是C波紫外线，其波长范围为200～275nm，杀菌作用最强的波段是250～270nm。紫外线可杀灭多种微生物，包括细菌、结核杆菌、病毒、真菌和芽胞。
作用机制：①破坏菌体蛋白使其光解变性；②降低菌体内氧化酶的活性；③使菌体DNA失去转化能力而死亡；④使空气中的氧电离产生极强杀菌作用的臭氧。
适用范围：紫外线多用于空气、物体表面和水及其他液体的消毒。
消毒方法：①空气消毒。每10m2地面面积安装30W紫外线灯管一只，有效距离不超过2m，照射时间为30～60min。②物品消毒。有效距离为25～60cm，照射时间为20～30min。
注意事项：①保持灯管清洁、无污垢，应经常（一般2周1次）用乙醇棉球擦拭；②紫外线照射可引起眼炎及皮肤病变，故照射时人应离开房间，必要时戴防护镜，穿防护衣；③由于紫外线穿透力差，消毒物品时应将物品摊开或挂起，使其表面直接照射；④紫外线消毒的适宜温度为20～40℃，相对湿度为40%～60%；⑤消毒时间须从灯亮5～7min开始计时，照射后应开窗通风；⑥定期检测灯管的辐射强度，如灯管辐射强度低于70μW/cm2时应更换，或建立使用登记卡，凡使用时间超过1 000h者应更换；⑦定期进行空气培养，以监测消毒效果。
3.臭氧灭菌灯消毒法 臭氧灯内装有臭氧发生器，在电场作用下，将空气中的氧气转换成高纯臭氧。臭氧以强大的氧化作用杀菌，可杀灭细菌繁殖体、病毒、芽胞、真菌并可破坏肉毒杆菌毒素。平常用于空气消毒、医院污水和诊疗用水的消毒、物品表面消毒。臭氧对人体有害，有人情况下不能使用，消毒结束后30min人员方可进入。
（三）微波消毒灭菌法
微波是频率在30～300 000MHz，波长在0.001～1m的电磁波。在电磁波的高频交流电场中，物品中的极性分子发生极化进行高速运动，并频繁改变方向，互相摩擦，使其温度迅速上升，达到消毒灭菌的作用。微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽胞、真菌孢子等。常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热非金属材料器械的消毒灭菌。
（四）电离辐射灭菌法
利用γ射线或电子加速器产生的高能电子来进行辐射灭菌。电离辐射灭菌的优点是灭菌彻底，无污染与残留；可在常温下进行灭菌；产品可在包装后灭菌；可持续不间断作业，节约能源。适用于不耐热的物品灭菌，如金属、橡胶、塑料、高分子聚合物（如一次性注射器）、精密医疗器械、生物制品及节育用具等的灭菌。
（五）过滤除菌法
通过三级空气过滤器，选用合理的气流方式，除掉空气中0.5～5μm的尘埃，达到洁净空气的目的。