三、实验步骤
成年狗一只→称重→3%戊巴比妥钠溶液(30mg/kg)全麻→仰卧固定→备皮→手术(四个切口)。
1.颈部正中切口(8cm) 自甲状软骨下缘沿颈部正中线作一直切口,下达胸骨上切迹,分离气管,器官插管,保持气道通畅,分离颈总动脉,插入动脉导管,接压力感受器,记录平均动脉压(MAP)、心率功率谱密度(Psd)、心率(HR)。
插管前必须注意充满肝素并排尽气体。
2.左、右股三角区切口(3cm) 在股三角区触及股动脉搏动后,沿动脉走向作3cm长切口。①游离左股动脉:插入动脉导管,夹端用动脉夹夹闭股动脉,另一端与储血瓶相边,以备放血;②游离右股静脉:插入导管(比划长度),测定中心静脉(CVP)及输液用。输液速度5~8滴/分。导管外端接三通管,一侧同输液瓶连接,缓慢输入生理盐水(5~8滴/分)以保持通畅(防止凝血),另一侧通过压力换能器与BL402生物信息系统相连测CVP。
3.耻骨联合上,下腹部正中切口(5cm) 找到膀胱,将其从腹腔拉出,沿背面膀胱三角区找到双侧输尿管,分离并插管,记录尿量(滴/分)(插管前排空尿液)。
4.右腹部旁正中切口(右腹直肌旁6cm) 钝性分离肌层,打开腹腔。推开大网膜,找出一段游离度较大的小肠肠襻,观察肠系膜微循环(cap数、口径、流速)。
区别:微动脉:色浅红、血流速快、由粗变细逐渐分支。微静脉:色暗红、血流速度较慢,由细变粗逐渐汇合。毛细血管:仅能通过一个血细胞。
5.温度计插入直肠,测肛温。(https://www.daowen.com)
实验前记录各指标→降低储血瓶、松开动脉夹→放血10秒使MAP降至40mmHg维持20秒,观察记录→停止放血、分组进行治疗→观察记录。
6.注意事项
(1)麻醉深浅要适度。过深可严重抑制呼吸;过浅则动物疼痛挣扎,影响观察,甚至引起神经源性休克。
(2)牵拉肠襻动作要轻,以免引起严重低血压,影响休克实验。
(3)尽量减少手术出血,分离血管及肌层时,应钝性分离,切勿使用手术刀或手术剪,若出血应设法止血。
(4)所有动脉导管、静脉导管及压力传感器内均应充盈肝素或生理盐水,并排尽气泡。
(5)压力传感器高度均应与狗心水平一致。
(6)观察微循环时,分清动脉、静脉及毛细血管,选好标志血管,固定视野,以保持前后观察结果一致。