皮内变态反应诊断技术

一、皮内变态反应诊断技术

在牛的结核病的诊断中，提纯结核菌素皮内试验是目前最有现实意义的好方法，也是我国乳牛结核病检疫规程规定的方法之一，现做简要介绍。

1.实验材料

提纯结核菌素（PPD）、1毫升注射器、针头、剪毛剪、游标卡尺、碘酒棉球、酒精棉球、镊子、消毒盘、工作服、口罩、乳胶手套。

2.实验操作

（1）确定注射部位及处理

1）注射部位：成年牛一般在颈侧中部1/3处，3月龄内的犊牛也可在肩胛部。

2）处理：首先给受检牛编号，助手对牛进行站立保定，术者戴口罩、手套；术部剪毛或剃毛（需提前1天，范围为直径10厘米）。用卡尺测量术部中央皮皱厚度并记录。术部消毒：先用碘酒棉球涂擦，再用酒精棉球脱碘。(https://www.daowen.com)

（2）牛结核菌素皮内注射 注射剂量：不论大小牛，一律皮下注射1万国际单位。先将牛型提纯结核菌素稀释成10万国际单位/毫升；用专用金属皮内注射器吸取稀释后的结核菌素0.1毫升；持注射器使针头与皮肤成30°角刺入术部中心皮肤内注入，注射部位应出现小泡；然后进行皮肤常规消毒。

（3）观察记录反应 注射后经72小时、96小时、120小时分别观察局部有无炎性反应，测量皮皱厚度，并详细记录。

（4）结果判定 若注射后72小时注射部位有明显的热痛、肿胀反应，皮皱厚度差大于或等于4毫米，则判为阳性反应，记为“+”；若局部炎性反应不明显，皮皱厚度差在2.1～3.9毫米之间，则判为可疑反应，记为“±”；若局部无炎性反应，皮皱厚度差在2.0毫米以下，则判为阴性，记为“-”。

3.注意事项

1）冻干牛型提纯结核菌素（PPD）稀释后当天用完。

2）对可疑反应牛，应在第1次注射30天后，在对侧用同一批次的结核菌素注射复检，若结果仍为可疑，再经30～45天后复检，若再为可疑，则判为阳性。