内侧半月板失稳术 （DMM）模型

以小鼠膝关节为例，DMM手术方法如下：膝关节局部备皮消毒后，沿髌骨远端和胫骨平台近端之间皮肤做一长约3mm的纵行切口 (图4-1A)，眼科镊钝性分离内侧半月板前角上的髌下脂肪垫。显露膝关节内侧半月板与胫骨平台前缘之间的内侧半月板胫骨韧带 (medialmeniscotibial ligament，MMTL)(图4-1B)，此时应注意避开外侧半月板胫骨韧带 (lateral meniscotibial ligament，LMTL)，LMTL位于MMLT的后面，走行与后者几乎平行。LMTL 与MMLT之间偶尔会有小韧带相连，术中遇到需将其切断。充分暴露MMTL后，用眼科剪小心将其剪断 (图4-1C)。失去MMTL保护后，内侧半月板有向内侧移位的趋势 (图4-1D)。DMM法保留了内侧半月板的完整性及其与内侧胫骨平台的贴合，这样能提供更大的承重区域，且对小鼠的损伤程度相对较轻，是手术诱导OA造模的首选方法。

图4-1　内侧半月板失稳术 （DMM）手术步骤

MMLT=medialmeniscotibial ligament(内侧半月板胫骨韧带)；MM=medialmeniscus(内侧半月板)。［本图引自Glasson，et al.Osteoarthritis Cartilage，2007，15(9)：1061-9.］

Glasson等［18］探讨了 DMM小鼠造模法的可行性，研究发现DMM小鼠模型膝关节呈轻中度的OA表现，股骨内侧髁 (medial femoral condyle，MFC)和胫骨平台内侧 (medial tibial plateau，MTP)中央负重区病变明显，且这些区域病变的严重程度随术后时间的推移而增加，最终发展为重度OA。然而，DMM模型中并未观察到胫骨平台后部病变，且损伤后的软骨修复几乎可以忽略不计，病变主要集中在膝关节内侧前中部，病变范围涉及胫骨平台和股骨髁 (图4-2)。小鼠手术后立即处死，未能观察到关节软骨损伤，而假手术组术后4周和8周仅有轻微的OA表现，这表明DMM动物模型并未受到明显的医源性损伤，确保了实验结果的准确性。ACLT造模法较之DMM造模法实施难度更大，需要较好的手术视野和娴熟的显微外科操作技术。ACLT手术操作范围涉及髁间区域，这里结构复杂，易造成医源性损伤。相比之下，DMM手术范围较表浅，只限于关节负重区域。另外值得注意的是，普通实验小鼠的遗传背景具有显著差异［19］，这也可能对研究结果的准确性造成影响。

OA动物模型常常被用于抗 OA药物 (disease modifying OA drugs，DMOADs)的筛选。ACLT小鼠模型由于损伤过于严重而不能很好地复制人类的OA病变，而显著的软骨再生也使病变评估复杂化。相比ACLT模型，DMM模型可以较好地模拟人类OA缓慢的病变过程，同时也适合于DMOADs的评估筛选。此外，DMM模型还广泛应用于靶基因的验证研究。研究表明，在ADAMTS5［20］和IL-lβ［21］基因敲除小鼠，DMM术后4周和8周OA病程进展明显减缓。可见，DMM模型的进一步研究将加速推动DMOADs走向临床。(https://www.daowen.com)

图4-2　DMM术后8周，膝关节冠状面连续切片 （从后到前）番红O染色

番红O染色显示：DMM术后，膝关节内侧半月板向内侧移位 (B-D)；前后交叉韧带完整，无异位软骨或骨形成 (C、D)；胫骨平台内侧和股骨内侧髁番红O染色缺失和纤维化 (▼表示方向，A-D)；未观察到软骨下骨病变。MFC=medial femoral condyle(股骨内侧髁)；LFC=lateral femoral condyle(股骨外侧髁)；MTP=medial tibial plateau(胫骨平台内侧)；LTP=lateral tibial plateau(胫骨平台外侧)；MM=medialmeniscus(内侧半月板)。［本图引自Glasson，et al.Osteoarthri-tis Cartilagem，2007，15(9)：1061-9.］