2.1.1　果蝇的饲养与杂交

2.1.1　果蝇的饲养与杂交

2.1.1.1饲养温度

根据不同实验的要求，果蝇分别被养在18℃、25℃、29℃环境中。

其中表达有tub-Gal80ts的果蝇先饲养在18℃培养箱中，4～5d后转移至29℃培养箱（原理详见2.1.3）进行饲养。为了增强Gal4表达活性[62]，我们会将某些特定杂交在29℃环境中进行（详见2.1.3）。其他果蝇均饲养于25℃环境中。

2.1.1.2果蝇培养基

本实验室用玉米粉—红糖—酵母培养基，配方如下：

制作过程如下：

（1）将称量好的琼脂与红糖混合后加入锅中，倒入适量水。

（2）加热至沸腾，持续搅拌待琼脂全部融化。(https://www.daowen.com)

（3）将事先用水搅拌溶解好的玉米糊缓慢倒入锅中（充分搅拌，防止黏锅）。

（4）将混合物煮沸。

（5）待混合物冷却稍许（70℃），加入事先用温水溶解的酵母糊。

（6）加入称量好的丙酸溶液，搅拌均匀。

（7）将食物分装至100m L玻璃小瓶中。

（8）塞上棉花后在阴凉干燥处晾干。

2.1.1.3果蝇分挑与杂交

本文中所有需要麻醉的果蝇均使用二氧化碳气体（CO2）麻醉的方法，在操作板上进行分挑。

用于杂交的处女蝇在羽化后8h内完成分挑。

杂交由4～5只特定基因型的处女蝇与4～5只相应的雄蝇完成。