JNK信号通路新成员的遗传筛选和功能研究_基础医学

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前言

黑腹果蝇（Drosophila melenogaster）是生物学研究的重要模式动物，许多信号通路新成员都是首先在果蝇中被发现和鉴定，然后在哺乳动物中被证实。J...

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第1章　研究背景

(https://www.daowen.com)...

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1.1　JNK信号通路

(https://www.daowen.com)...

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1.1.1　JNK信号通路概述

动物在生长发育过程中，当体内细胞所处的环境条件发生改变，包括营养成分、生长因子、细胞因子浓度的变化，或渗透压、温度、p H值改变及受到辐射等众多外界的刺激和影响...

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1.1.2　JNK通路与细胞凋亡

程序性细胞死亡（programmed cell death）或凋亡（apoptosis）是生物体应对环境变化的一种重要调节方式，在动物生长发育过程中起着不可替代...

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1.1.3　JNK通路与肿瘤发生及迁移

癌症是影响人类健康最为严重的疾病之一。美国癌症研究报告显示，1/4的死亡是由癌症导致的，仅在2011年，美国就有57万人死于癌症，并且有高达160万人在该年患上...

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1.1.4　JNK通路与其他人类疾病

除了与凋亡、迁移及肿瘤发生密切相关外，JNK信号通路还与糖尿病、心脏肥大反应、代谢综合征、免疫疾病，特别是神经退行性疾病（如AD、PD）等多种疾病发生发展有密切...

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1.2　果蝇——杰出的模式生物

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1.2.1　果蝇作为模式生物的优势

黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）是生物学研究中最重要的模式生物之一，早在20世纪初，Morgan就选择黑腹果蝇作为研究对象，至今已有1...

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1.2.2　基于果蝇眼成虫盘的肿瘤发生及迁移模型

细胞迁移的发生涉及细胞极性的改变和肌动蛋白及细胞骨架的重塑，上皮细胞需要经历上皮间质转换（epithelial-mesenchymal transition，E...

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1.2.3　基于果蝇翅膀成虫盘的迁移模型

近年来研究人员发现翅成虫盘（wing disc）也可以作为研究体内细胞迁移的有力模型。翅成虫盘结构简单，仅由一层上皮细胞构成，并且细胞排列紧密，极性分布有序。利...

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1.2.4　果蝇肿瘤移植模型

学者经常用到的另外一种果蝇迁移模型就是移植实验，通过将遗传突变造成的肿瘤组织移植到新宿主果蝇（通常为雌性）的腹部，通过统计次生肿瘤出现在其他组织或器官的数量及程...

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1.2.5　果蝇作为药物筛选模型

尽管全球制药工业每年都会投入大量的人力及物力于药物筛选和研发，但在新药发现方面取得的成绩却非常的低。而近年来随着科学家对果蝇遗传学理解的一步步深入，及果蝇能够作...

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1.2.6　果蝇背部闭合过程

此外，我们还可以用果蝇研究发育过程中的细胞运动，包括背部/胸部闭合（dorsal/thorax closure）及卵子发生过程中的边缘细胞（border cel...

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1.3　研究目的、内容及意义

JNK信号通路是机体正常与疾病状态时的一个重要调节靶点，并与生物体发育过程中细胞凋亡，肿瘤增殖、迁移等一系列重要生理生化活动密切相关。因此，筛选并鉴定出更多调节...

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第2章　材料与方法

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2.1　果蝇遗传学

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2.1.1　果蝇的饲养与杂交

2.1.1.1饲养温度根据不同实验的要求，果蝇分别被养在18℃、25℃、29℃环境中。其中表达有tub-Gal80ts的果蝇先饲养在18℃培养箱中，4～5d...

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2.1.2　果蝇品系及来源

Gal4品系： GMR-Gal4，sev-Gal4，ey-Gal4，pnr-Gal4，ptc-Gal4，sd-Gal4来自Bloomington stock c...

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2.1.3　Gal4/UAS系统

Gal4/UAS系统是果蝇研究中最常用的异位基因表达系统。Gal4是来自酵母的转录激活蛋白（transcription activator protein），将...

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2.1.4　FLP/FRT技术

癌症的发生往往始于单个体细胞突变而引发的过度增殖，并最终形成恶性肿瘤。为了模拟体内真实情况，研究少数细胞遗传学改变后对周围正常机体及组织造成的影响，科学家发明了...

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2.1.5　RNAi技术

(https://www.daowen.com) RNAi（RNA interference）又名转录后的基因沉默（post transcriptional g...

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2.1.6　免疫组化及染色

2.1.6.1果蝇幼虫成虫盘的解剖成虫盘（imaginal disc）是果蝇幼虫发育过程中形成的未分化的细胞团，不同的成虫盘会在变态期后分别发育分化为腿、翅膀...

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2.2　分子生物学、生物化学及细胞生物学

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2.2.1　实验材料与仪器

2.2.1.1质粒本文所用质粒： ●p UAST-Wnd-EGFP本实验室构建 ●p UAST-Rho1-HA本实验室构建 ●p UAST-MKK4-HA本实...

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2.2.2　实验方法

2.2.2.1 Ef fectene转染细胞所有试验质粒的转染均采用Effectene转染试剂盒（QIAGEN），试验流程如下：（1）转染前6h铺种适量S2...

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第3章　JNK信号通路新成员的遗传筛选

(https://www.daowen.com)...

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3.1　筛选模型的建立

早在2002年，研究人员就发现用GMR-Gal4在果蝇眼部特异性的过表达肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）的果蝇同源物Eiger...

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3.2　筛选及鉴定流程

如图3-2所示，首先我们将GMR＞Egr M果蝇与含有染色体缺失片段的果蝇杂交，看子一代中果蝇的小眼表型是否增强或抑制。接下来对有增强或抑制效果的缺失片段，进一...

《JNK信号通路新成员的遗传筛选和功能研究》简介

前言

目录

第1章　研究背景

1.1　JNK信号通路

1.1.1　JNK信号通路概述

1.1.2　JNK通路与细胞凋亡

1.1.3　JNK通路与肿瘤发生及迁移

1.1.4　JNK通路与其他人类疾病

1.2　果蝇——杰出的模式生物

1.2.1　果蝇作为模式生物的优势

1.2.2　基于果蝇眼成虫盘的肿瘤发生及迁移模型

1.2.3　基于果蝇翅膀成虫盘的迁移模型

1.2.4　果蝇肿瘤移植模型

1.2.5　果蝇作为药物筛选模型

1.2.6　果蝇背部闭合过程

1.3　研究目的、内容及意义

第2章　材料与方法

2.1　果蝇遗传学

2.1.1　果蝇的饲养与杂交

2.1.2　果蝇品系及来源

2.1.3　Gal4/UAS系统

2.1.4　FLP/FRT技术

2.1.5　RNAi技术

2.1.6　免疫组化及染色

2.2　分子生物学、生物化学及细胞生物学

2.2.1　实验材料与仪器

2.2.2　实验方法

第3章　JNK信号通路新成员的遗传筛选

3.1　筛选模型的建立

3.2　筛选及鉴定流程

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前言

目录

第1章 研究背景

1.1 JNK信号通路

1.1.1 JNK信号通路概述

1.1.2 JNK通路与细胞凋亡

1.1.3 JNK通路与肿瘤发生及迁移

1.1.4 JNK通路与其他人类疾病

1.2 果蝇——杰出的模式生物

1.2.1 果蝇作为模式生物的优势

1.2.2 基于果蝇眼成虫盘的肿瘤发生及迁移模型

1.2.3 基于果蝇翅膀成虫盘的迁移模型

1.2.4 果蝇肿瘤移植模型

1.2.5 果蝇作为药物筛选模型

1.2.6 果蝇背部闭合过程

1.3 研究目的、内容及意义

第2章 材料与方法

2.1 果蝇遗传学

2.1.1 果蝇的饲养与杂交

2.1.2 果蝇品系及来源

2.1.3 Gal4/UAS系统

2.1.4 FLP/FRT技术

2.1.5 RNAi技术

2.1.6 免疫组化及染色

2.2 分子生物学、生物化学及细胞生物学

2.2.1 实验材料与仪器

2.2.2 实验方法

第3章 JNK信号通路新成员的遗传筛选

3.1 筛选模型的建立

3.2 筛选及鉴定流程

第1章　研究背景

1.1　JNK信号通路

1.1.1　JNK信号通路概述

1.1.2　JNK通路与细胞凋亡

1.1.3　JNK通路与肿瘤发生及迁移

1.1.4　JNK通路与其他人类疾病

1.2　果蝇——杰出的模式生物

1.2.1　果蝇作为模式生物的优势

1.2.2　基于果蝇眼成虫盘的肿瘤发生及迁移模型

1.2.3　基于果蝇翅膀成虫盘的迁移模型

1.2.4　果蝇肿瘤移植模型

1.2.5　果蝇作为药物筛选模型

1.2.6　果蝇背部闭合过程

1.3　研究目的、内容及意义

第2章　材料与方法

2.1　果蝇遗传学

2.1.1　果蝇的饲养与杂交

2.1.2　果蝇品系及来源

2.1.3　Gal4/UAS系统

2.1.4　FLP/FRT技术

2.1.5　RNAi技术

2.1.6　免疫组化及染色

2.2　分子生物学、生物化学及细胞生物学

2.2.1　实验材料与仪器

2.2.2　实验方法

第3章　JNK信号通路新成员的遗传筛选

3.1　筛选模型的建立

3.2　筛选及鉴定流程