鸡新城疫的实验室诊断方法有哪些？
仅根据流行病学特点、症状和病理剖检变化只能作出初步推断，新城疫的确诊还须进行实验室病原分离与鉴定、血清学和分子生物学检测。
（1）病毒分离培养 选发病初期病鸡的脾、肺、脑、气管或泄殖腔分泌物，或发病中后期病鸡的脑或骨髓。无菌处理成乳剂后，接种于9～11日龄的鸡胚尿囊腔内，37℃温箱孵育；也可用鸡胚成纤维细胞或鸡肾细胞进行分离培养。收集符合条件的鸡胚尿囊液或细胞培养物作病毒鉴定。病毒分离除确诊疾病外，还可以对新分离的病毒进行生物学特性测定，以确定其病毒的毒力。
（2）血清学诊断 病毒分离鉴定费时费力，很少用于临床诊断。新城疫病毒感染后不久，体内可产生循环抗体，所以可通过血清学方法检测新城疫抗原或抗体以诊断新城疫。
①血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）。根据新城疫病毒具有凝集禽类和某些哺乳动物红细胞的特性（以鸡红细胞最佳），病毒分离出来后，可以进行红细胞凝集，且可被新城疫阳性血清所抑制，故常用HA和HI对分离的病毒进行诊断。HI除作为病毒鉴定外，还可鉴定鸡群血清中特异性抗体水平。如未免疫鸡血清中测出特异性抗体，即判定感染新城疫病毒；免疫鸡群，比较发病前后抗体HI效价的变化，也可判定是否有新城疫病毒感染；HI试验在流行病学调查和判定是否发生新城疫具有实用价值，也可确定疫苗免疫的效果，或为免疫计划提供依据。
②琼脂扩散试验（AGP）。AGP试验用于检查死鸡体内的新城疫病毒。鸡死于新城疫时，脏器中需有大量病毒增殖才能将其致死，将脏器中的病毒视作抗原，同已知的新城疫阳性血清做AGP试验，如果出现阳性时即可作出诊断。
【提示】 因AGP试验的敏感性低于HI试验，故在日常的抗体检查中只用HI试验，在抗原的检查中则可用AGP试验。
③中和试验。用已知抗新城疫病毒的血清来鉴定可疑病毒，也可用已知的新城疫病毒来测定血清中是否有特异性抗体，以确定鸡群是否感染过鸡新城疫。中和试验可在鸡胚或细胞培养以及易感鸡中进行。
④荧光抗体技术。荧光标记的抗体与相应的抗原可发生特异性结合，形成带有荧光的抗原-抗体复合体，在荧光显微镜下，可看到荧光（黄绿色、红色或蓝色）。该方法对新城疫病毒的检查极快速，且具有高度特异性和敏感性。
⑤酶联免疫吸附试验（ELISA）。能够检验新城疫病毒在细胞培养中的生长情况。如有新城疫病毒生长，在细胞核边缘可见到明显的棕褐色酶染斑点。它能直接检出病鸡或带毒鸡的泄殖腔和口腔中的新城疫病毒。该方法比HA、HI和荧光抗体技术更敏感，特异性更强，是快速且准确的诊断方法。
⑥单克隆抗体技术。用单克隆抗体对人工感染和自然感染病例进行免疫荧光检查，检出率较高。它不仅可用于新城疫的诊断，而且可进行新城疫部分毒株毒力的定型。
（3）分子生物学诊断 分子生物学技术具有快速、特异、灵敏等优点。
①DNA探针检测技术。采用人工合成的特异的寡核苷酸DNA进行印迹杂交试验，可特异识别新城疫病毒。
②实时荧光定量RT-PCR法。能够快速检测中、强毒力新城疫病毒，并且能够准确定量病毒载量。